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.2005年9月至今;40(5):367-72.
doi:10.1093/alcalc/agh170。 Epub 2005年6月6日。

乙醇对大鼠肝星状细胞组蛋白h3的修饰

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乙醇对大鼠肝星状细胞组蛋白h3的修饰

Jee-Soo Kim先生等人。 酒精酒精. 2005年9月至今.

摘要

目的:肝星状细胞(HSC)在包括酒精在内的各种因素引起的肝纤维化的发展中起着关键作用。乙醇引起组蛋白的翻译后修饰。本研究的目的是研究乙醇是否影响大鼠HSC组蛋白H3的乙酰化和甲基化。

方法:我们使用胶原酶灌注肝脏,然后Nycodenz密度梯度离心分离HSC。HSC被分割,并用不同浓度的乙醇处理不同时间。采用酸提取法分离组蛋白。用western blot和异硫氰酸荧光素(FITC)免疫化学染色分析组蛋白H3在Lys9的乙酰化和甲基化。western blotting检测组蛋白H3在Lys9(Ac-H3-Lys9)、Lys14(Ac-H3-Lys14)、Lys18(Ac-H3-4lys18)或Lys23(Ac-H3-1lys23)的乙酰化。

结果:在赖氨酸9中,乙醇导致Ac-H3的剂量依赖性增加,最高可达200 mM。Ac-H3-lys9在72 h和200 mM乙醇处理时增加了86倍,之后减少。western blotting和FITC染色证实了这种增加。在高剂量下,乙醇增加了组蛋白H3在Lys23(Ac-H3-Lys23)的乙酰化,但对Ac-H3-lys14或Ac-H3-Ls18没有影响。FITC-标记的Lys9(Me-H3-Lys9)二甲基istone H3抗体的强度似乎随乙醇剂量的增加而略有降低。但当用免疫印迹法监测时,这似乎并没有改变。

结论:乙醇导致组蛋白H3在Lys9处乙酰化的剂量和时间依赖性增加,但在Lys14或Lys18处没有。与肝细胞相比,HSC中的Ac-H3-lys9需要更长的乙醇暴露时间。Me-H3-lys9的水平似乎保持不变。因此,Ac-H3-lys9的增加代表暴露于乙醇的HSC中的核染色质修饰事件。

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