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.1992年1月;41(1):75-84.
doi:10.1016/0165-0270(92)90125-w。

血脑屏障损伤中辣根过氧化物酶的保留和洗脱

附属机构

血脑屏障损伤中辣根过氧化物酶的保留和洗脱

P A斯图尔特等。 神经科学方法杂志. 1992年1月.

摘要

辣根过氧化物酶(HRP)被广泛用于观察血脑屏障(BBB)的破坏。除了其视觉特性外,还可以测量HRP活性,因此可以快速简单地量化屏障泄漏。此外,同样的组织可以用于电子显微镜研究,在电子显微镜下可以解决泄漏的结构基础。在此,我们描述了两种使用HRP定量屏障损伤的方法:一种用于乙醇和巴比妥类药物联合引起的小的多灶屏障损伤,另一种用于大的单灶坏死性损伤。我们确定了每种药物的最佳循环时间和固定方法。在多灶屏障损伤的情况下,长达1分钟的短期HRP循环可准确标记单个泄漏血管段,然后可对其进行计数并计算其密度。由于灌注固定将渗出的HRP从组织中清除出来,因此浸入固定是必要的。在冷冻处理中,至少需要5分钟的循环时间才能向组织输送可接受量的HRP。组织滞留随着循环时间的延长而增加,达到30分钟的最佳值,但随后下降。灌注固定1h不影响HRP的组织保留。

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