Barrier-to-autointegration factor is required to segregate and enclose chromosomes within the nuclear envelope and assemble the nuclear lamina

doi:10.1073/pnas.0408364102

。2005年3月1日；102（9）：3290-5。

doi:10.1073/pnas.0408364102。 Epub 2005年2月22日。

自我整合因子的屏障是将染色体分离并包裹在核膜内并组装核纤层所必需的

阿耶利特·马加利特¹, 米里亚姆·塞古拉·托滕, 约瑟夫·格伦鲍姆, 凯瑟琳·威尔逊

附属公司

PMID： 15728376
PMCID公司：项目编号：C552915
内政部： 10.1073/pnas.0408364102

屏障-自整合因子需要在核膜内分离和包裹染色体，并组装核膜

阿耶利特·马加利特等。美国国家科学院程序。 2005。

。2005年3月1日；102(9):3290-5.

doi:10.1073/pnas.0408364102。 Epub 2005年2月22日。

作者

阿耶利特·马加利特¹, 米里亚姆·塞古拉·托滕, 约瑟夫·格伦鲍姆, 凯瑟琳·威尔逊

附属

¹耶路撒冷希伯来大学生命科学研究所遗传学系，以色列耶路撒冷吉瓦特·拉姆，邮编：91904。

PMID： 15728376
PMCID公司：项目编号：C552915
内政部： 10.1073/pnas.0408364102

摘要

屏障自整合因子（BAF）结合dsDNA、LEM域蛋白和层粘连蛋白。秀丽隐杆线虫BAF需要Ce-lamin和两个LEM域蛋白（Ce-emerin和Ce-MAN1）在核组装期间定位。目前尚不清楚Ce-lamin和LEM蛋白是否反过来依赖于Ce-BAF（相互依赖的结构角色）。RNA干扰介导的Ce-BAF下调早在两细胞期就造成了染色体分离、染色质去凝聚和有丝分裂进展的严重缺陷，胚胎在大约100细胞期死亡。核孔重新组装，而Ce-lamin、Ce-emerin和Ce-MAN1结合染色质，但仍呈斑块状且无组织。核膜形成，但未能包住后期酶脊染色质。时间推移成像显示了两种表型：最终溶解的后照带染色质和返回中间区域的分离染色质。因此，BAF、层粘连蛋白和LEM域蛋白的组装是相互依赖的，并且需要捕获新生核膜内分离的染色体。通过下调Ce-BAF逃过致命性的胚胎发育成具有错位远端尖端细胞和性腺的不育成人，进一步表明BAF的轻度胚后减少会破坏组织特异性功能。

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数字

**图1。**
Abs对抗Ce-BAF(A类)人BAF（hBAF）和*秀丽线虫*BAF（ce-BAF）。相同和相似的氨基酸分别用黑色和灰色表示。黑线表示Ce-BAF的残基28–41（血清3778和3280的肽抗原）和残基65–80（血清3779的抗原）。(B类)类似数量的细菌表达Ce-lamin的免疫印迹(上部)或Ce-BAF(底部)在加载到凝胶上之前，这两种物质都用8 M尿素溶解（参见*材料和方法*)用抗Ce-BAF（αBAF）的免疫血清3778、3779或3280或抗Ce-lamin（αLam）的血清3932进行检测。(C类)混合阶段粗蛋白提取物的Western blot秀丽线虫用免疫前（P）或免疫（I）血清3280检测动物。(D类)野生型间接免疫荧光染色*秀丽线虫*含有针对内源性Ce-lamin（绿色）、内源性Ce-BAF（血清3778，红色）和合并信号的抗体的胚胎（合并）。（比例尺，10μm）

**图2。**
桥接染色质和分离染色质中核膜标记的定位*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎。(A类)Ce-BAF蛋白在*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎。用血清3779进行间接免疫荧光染色，将内源性Ce-BAF定位在喂食空L4440载体的蠕虫胚胎细胞核中(赖特). (左侧)A类*baf-1型*(*RNA干扰*)DNA DAPI染色胚胎(左侧)和Ce-BAF(居中); Ce-BAF蛋白信号显著降低。箭头表示细胞核异常浓缩染色质。箭头表示后期带脊的染色质。（巴，10μm）(B类)蛋白质裂解物的免疫印迹*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎，*lmn-1型*(*RNA干扰*)用抗Ce-lamin抗体检测喂食L4440空载体（对照）的胚胎或野生型蠕虫的胚胎(上部)或Ce-BAF（血清3280；下部). Ce-lamin蛋白水平未受影响，而Ce-BAF在*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎。(C类)有丝分裂磷酸化持续存在于后期酶脊染色质上。A典型*baf-1型*(*RNA干扰*)用DAPI（以可视化DNA）和Abs对组蛋白H3（PH3）上的有丝分裂磷酸表位进行胚胎双重染色。箭头表示有丝分裂细胞中的正常中期染色体。箭头表示三对不同的分离染色质，每一对由桥接染色质连接。PH3可染色桥接染色质，但不能染色分离的染色质。（巴，10μm）(D类)胚胎DAPI染色显示DNA，并使用针对以下内源性蛋白之一的抗体进行间接免疫荧光染色：核穿孔蛋白（mAb 414）、Ce-lamin、Ce-emerin、Ce-MAN1或matefin。箭头指向连接两个分离的染色质团的后桥染色质。414和emerin染色的图像中的箭头（分别）指示分离的染色质的相应质量中的一个或两个。（棒材，10μm）

**图3。**
桥联染色质的动力学行为*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎。(*A–C*)成人*秀丽线虫*稳定表达H2B-GFP的细菌喂食表达Ce-BAF dsRNA的细菌。（Bar，10μm）(A类)对应H2B-GFP(顶部)，驾驶员信息中心(*中间）*，并合并H2B-GFP/DIC图像(底部)四细胞胚胎；尽管存在桥接染色质，但子细胞仍经历了胞质分裂。(B类)桥形成后每隔2分钟记录一次活胚胎中H2B-GFP的时间推移图像；明显桥接的染色质最终分解为子核。(C类)H2B-GFP在活胚胎中的时间推移图像，从前中期（0分钟）开始每隔1.5分钟记录一次，此时染色体凝聚不均匀。在明显正常的中期（1.5–3分钟）后，大多数染色质分离（4.5–7.5分钟），但后来又回到中间带（10.5–13.5分钟；见正文）。

**图4。**
核形态*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎。可视化*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎的薄层透射电子显微镜检查。(A类和B类)左侧和右侧的图像分别表示黑线所示区域的低倍和高倍视图。大多数核在其核膜中有一个很大的缺口（缺口边缘用箭头表示A类和B类)推测桥接染色质的位置。箭头在A类表明线粒体靠近桥接染色质。箭头在B类显示中央染色质和更浓缩的外周染色质之间的边界。(*B右侧*)星号表示染色质外观与桥接染色质相似。(C类)染色质分离的高放大率视图*baf-1型*(*RNA干扰*)胚胎显示出密集的NPC（箭头）。每个图像中都标记了比例尺。Nu，核质；cyt，细胞质。

**图5。**
存活蠕虫的性腺形态和DTC迁移表型*baf-1型*(*RNA干扰*)治疗。(A类)DAPI染色的成虫是从喂食空L4440载体的母亲的胚胎中孵化出来的。性腺用星号标记。(B类和C类)两条DAPI染色的成虫从*baf-1型*(*RNA干扰*)-接受治疗的母亲。用星号标记的性腺很小，放错了位置。(D类)DIC成像显示，从喂食空L4440载体的JK2049菌株母亲的对照胚胎中孵化出的成虫(左侧)和GFP荧光(赖特); GFP标记DTC。(E类和F类)两条成虫从*baf-1型*(*RNAi）*-接受治疗的JK2049名母亲，DIC成像(左侧)和GFP荧光(赖特). (*D-F公司*)驾驶员信息中心（DIC）图像中的箭头表示DTC位置异常E类和F类，或通常位于D类。

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1. Lee，M.S.和Craigie，R.（1998）Proc。国家。阿卡德。科学。美国95，1528-1533。-项目管理咨询公司-公共医学
1. Segura-Totten，M.&Wilson，K.L.（2004）《细胞生物学趋势》。14, 261-266.-公共医学
1. Lee，K.K.&Wilson，K.L.（2004）交响乐。Soc.实验生物学。56, 329-339.-公共医学
1. Furukawa，K.（1999）《细胞科学杂志》。112, 2485-2492.-公共医学
1. Cai，M.，Huang，Y.，Ghirlando，R.，Wilson，K.L.，Craigie，R.&Clore，G.M.（2001）EMBO J.20，4399-4407。-项目管理咨询公司-公共医学

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[1] Lee，M.S.和Craigie，R.（1998）Proc。国家。阿卡德。科学。美国95，1528-1533。-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Lee，M.S.和Craigie，R.（1998）Proc。国家。阿卡德。科学。美国95，1528-1533。-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Segura-Totten，M.&Wilson，K.L.（2004）《细胞生物学趋势》。14, 261-266.-公共医学

[4] Segura-Totten，M.&Wilson，K.L.（2004）《细胞生物学趋势》。14, 261-266.-公共医学

[5] Lee，K.K.&Wilson，K.L.（2004）交响乐。Soc.实验生物学。56, 329-339.-公共医学

[6] Lee，K.K.&Wilson，K.L.（2004）交响乐。Soc.实验生物学。56, 329-339.-公共医学

[7] Furukawa，K.（1999）《细胞科学杂志》。112, 2485-2492.-公共医学

[8] Furukawa，K.（1999）《细胞科学杂志》。112, 2485-2492.-公共医学

[9] Cai，M.，Huang，Y.，Ghirlando，R.，Wilson，K.L.，Craigie，R.&Clore，G.M.（2001）EMBO J.20，4399-4407。-项目管理咨询公司-公共医学

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