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.2005年3月;67(3):909-19.
doi:10.1111/j.1523-1755.2005.00155.x。

常染色体显性多囊肾病(ADPKD)中caspase介导的细胞凋亡途径

附属机构
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常染色体显性多囊肾病(ADPKD)中caspase介导的细胞凋亡途径

陶云霞等。 肾脏Int. 2005年3月.
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摘要

背景:我们最近证实,患有常染色体显性多囊肾病(ADPKD)的汉族:SPRD大鼠肾脏的凋亡增加。胱天蛋白酶-3和胱天蛋白酶-7是细胞凋亡的主要介质。caspase-3和caspase-7介导的细胞凋亡有两条途径:(1)涉及死亡受体Fas、Fas配体(FasL)和caspase-8的“外源”途径;(2)涉及Bcl-2蛋白、caspase-2、细胞色素c释放和caspase9的“线粒体”或“内源”途径。本研究的目的是研究患有ADPKD的3周龄Han:SPRD大鼠的细胞凋亡途径。

方法:用荧光底物测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活性。分别用核糖核酸酶保护试验和免疫印迹法测定mRNA和蛋白质。测定了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂对多囊肾中半胱氨酸蛋白酶活性的影响。

结果:与杂合肾(Cy/+)和正常同卵对照肾(+/+)相比,纯合子肾(Cy/Cy)的Caspase-3和Caspase-7活性增加了100%以上。核糖核酸酶保护试验显示caspase-3 mRNA无差异。免疫印迹显示,与+/+和Cy/+肾脏相比,Cy/Cy中caspase-2和caspase-7的表达增加。与Cy/+和+/+肾脏相比,Cy/Cy中的Caspase-8和Caspase-9活性增加了100%以上。免疫印迹显示,Cy/Cy肾脏中caspase-8和caspase-9的表达增加。细胞色素c释放到胞浆中的量也增加,半胱氨酸蛋白酶-2蛋白和Cy/Cy肾脏中的活性也增加。在核糖核酸酶保护试验中,+/+、Cy/+和Cy/Cy肾脏的FasL mRNA没有差异。使用caspase抑制剂IDN-8050对Cy/Cy大鼠进行短期治疗,导致肾脏中caspase-3和caspase-7活性受到抑制。

结论:在患有ADPKD的Cy/Cy肾脏中,caspase-9的形式增加,细胞色素c释放到胞浆中增加,caspase-2蛋白和活性增加,表明参与了内在途径。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8的形式增加,表明参与了外源性途径。FasL mRNA无差异,表明外源性途径独立于死亡受体配体FasL。

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