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.1992年2月;3(2):129-42.
doi:10.1091/mbc.3.2129。

完整膜蛋白插入内质网缺陷的蛋白质易位突变体

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完整膜蛋白插入内质网缺陷的蛋白质易位突变体

C J斯特林等。 分子生物学细胞. 1992年2月.
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摘要

可溶性分泌蛋白移位到内质网腔中缺陷的酵母突变体(sec61、sec62、sec63)在II型膜蛋白二肽氨基肽酶B(DPAPB)的组装和糖基化过程中不受影响或由酵母羟甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMG1)与酵母组氨酸脱氢酶(HIS4C)融合的多跨膜结构域组成的嵌合膜蛋白。这种嵌合体在野生型或突变细胞中组装,使得His4c蛋白定向于内质网腔,因此不可用于细胞溶质组氨酸转化为组氨酸。含有嵌合体的细胞被用来选择新的易位缺陷sec突变体。已分离出定义两个互补组的温度敏感致命突变:一个新的等位基因sec61和一个新基因sec65的单一分离物。新分离物在DPAPB的组装以及分泌蛋白α因子前体方面存在缺陷。因此,嵌合膜蛋白允许选择限制性更强的sec突变,而不是定义仅用于膜蛋白组装的基因。对SEC61基因进行克隆、测序,并用于制备检测SEC61蛋白的多克隆抗血清。该基因编码一个具有5到8个潜在跨膜结构域的53-kDa蛋白,Sec61p抗血清检测定位于内质网膜的完整蛋白。Sec61p似乎在分泌和膜多肽插入内质网中发挥关键作用。

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