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.2004;13(4):385-91.
doi:10.3727/000000004783983800。

体外连续传代培养成年大鼠骨髓源性肝细胞样细胞

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体外连续传代培养成年大鼠骨髓源性肝细胞样细胞

宫崎雅弘等。 细胞移植. 2004.
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摘要

此前,我们发现成年大鼠骨髓中存在肝细胞生长因子受体(c-Met)和α-脂肪蛋白(AFP)表达细胞,这些细胞也表达造血干细胞标记物,如CD34、Thy-1和c-Kit。当骨髓细胞在含有HGF和EGF的肝细胞生长培养基(HGM)中培养时,由类似成熟肝细胞的多边形细胞组成的集落在2周后出现,由于基质细胞过度生长,集落生长非常缓慢。在第34-41天,用注射针在相差显微镜下观察,从其集落中划出2-mm2片状肝细胞样细胞,转移到24孔板的孔中,并在有或无HGF和EGF的HGM培养基中培养。当细胞达到融合时,用胰蛋白酶和EDTA分离细胞,并逐步转移到更大的培养容器中。因此,肝细胞样细胞在不到4个月的时间内扩增了1000倍。对这些细胞进行免疫细胞化学染色以检测白蛋白、AFP和上述造血干细胞标记物,显示出卵圆细胞的特征。通过RT-PCR,我们检测了色氨酸-2,3-二加氧酶和酪氨酸转氨酶的mRNA,它们是肝细胞分化末期的标志物。本培养体系可为细胞移植治疗提供肝细胞资源。

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引用人

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