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.2004年6月;11(6):567-73.
doi:10.1038/nsmb769。 Epub 2004年5月2日。

病毒进入期间单个流感病毒周围的内吞机制组装

附属公司

病毒进入期间单个流感病毒周围的内吞机制组装

迈克尔·J·鲁斯特等。 自然结构分子生物学. 2004年6月.

摘要

大多数病毒通过受体介导的内吞作用进入细胞。然而,他们中许多人使用的进入机制仍不清楚。病毒以细胞内吞机制为靶点的方式也基本未知。我们通过荧光显微镜实时跟踪单个病毒与细胞内吞结构的相互作用,研究了流感病毒的进入机制。我们的结果表明,流感可以并行利用网格蛋白介导的和网格蛋白和小窝蛋白诱导的依赖性内吞途径,这两种途径导致病毒融合的效率相似。值得注意的是,采用网格蛋白介导途径的病毒通过在病毒结合位点从头形成网格蛋白包被的凹坑(CCP)进入细胞。CCP在这些位点的形成速度比细胞表面其他部位快得多,这表明病毒诱导的CCP形成机制可能被许多其他类型的病毒普遍利用。

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图1
图1
表达EYFP-clathrin的BS-C-1细胞中氯氰菊酯涂层结构的荧光图像。为了更清晰地显示离散荧光点,已从图像中减去细胞质EYFP-clathrin引起的低频背景。比例尺:3μm()瞬时转染EYFP-clathrin的细胞中氯氰菊酯涂层结构的免疫荧光图像(b)同一细胞中氯氰菊酯涂层结构的EYFP荧光图像。(c(c))免疫荧光信号(红色)与EYFP信号(绿色)叠加。带有红色和绿色信号的像素显示为黄色。多个细胞中的计数点显示,免疫荧光图像中97%以上的网格蛋白涂层结构与EYFP图像中的结构共定位。图像右上角的仅红色斑点属于未用EYFP网格蛋白转染的相邻细胞(d日)稳定表达EYFP-clathrin的细胞的转铁蛋白图像(红色)和EYFP图像(绿色)的叠加。Alexa Fluor 647标记的转铁酶(分子探针)在4°C下与细胞结合15分钟。去除未结合的转铁蛋白后,在室温下对细胞成像。显示了前5秒的图像。96%以上的转铁蛋白斑点与氯氰菊酯涂层结构共定位,呈现黄色。
图2
图2
流感病毒通过多种途径内化。()通过CCP内化的病毒快照。此病毒的实时电影可通过以下方式获得:补充视频3.比例尺:10μm。t=0秒:病毒(红色)与细胞结合。t=50秒:病毒正在经历第一阶段的运动。t=115秒:在病毒位点开始形成标记有EYFP(绿色)的CCP。t=150s,氯氰菊酯涂层达到其峰值荧光强度。t=175秒:氯菊酯涂层迅速分解。t=181秒:病毒通过微管向细胞核输送(第二阶段运动)。t=202秒:病毒进入第三阶段运输,涉及微管上的正端和负端定向运动。t=235秒:病毒继续第三阶段运动。(b)病毒通过内化的时间轨迹从头开始成立CCP。黑色符号是病毒的速度-时间轨迹。第二阶段运动被确定为从细胞外围到核周区域的快速单向移位(红色箭头)。绿色符号是与病毒相关的EYFP-板球蛋白的综合荧光强度。(c(c))病毒内部化的时间轨迹与网格蛋白涂层结构无关。符号定义见b。两种病毒的现场电影bc(c)也有(补充视频4和5).
图3
图3
CCP和CCV的动态形成从头开始在病毒结合点。()病毒结合与CCP形成之间的时间直方图。(b)CCP形成开始与CCV脱膜之间的时间直方图。插图:与病毒相关的EYFP-板条蛋白强度的60条时间轨迹的平均曲线显示了CCP的生命周期。每个EYFP-clathrin轨迹都被归一化为峰值高度,并在时间上进行缩放,以便CCP形成的开始时间为t=0秒,而网格蛋白峰值强度为t=69秒,这是网格蛋白积累阶段的平均持续时间。(c(c))第一次CCV脱膜事件与第二阶段病毒运动开始之间的时间直方图。
图4
图4
神经氨酸酶(NA)抑制剂对流感病毒内吞作用的影响。灰色柱显示了在没有神经氨酸酶抑制剂的情况下,病毒结合和第二阶段运动开始之间的时间直方图。红色列显示1μM RWJ270201存在时的直方图。1μM奥司他韦的直方图相似(数据未显示)。
图5
图5
内吞作用后成功融合的病毒的时间轨迹。()通过CCP内化的病毒示例。(b)一个与CCP无关的内部化例子。有这两种病毒的现场电影(补充视频6和7). 黑色符号是病毒的速度-时间轨迹。红色符号是病毒的集成DiD荧光强度。病毒融合可以确定为DiD信号的急剧增加。绿色符号是与病毒相关的EYFP-板球蛋白的综合荧光强度。

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    1. Matlin KS,Reggio H,Helenius A,Simons K。犬肾细胞系中流感病毒的感染途径。细胞生物学杂志。1981年;91:601–613.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Doxsey SJ,Brodsky FM,Blank GS,Helenius A.通过抗网格蛋白抗体抑制内吞作用。单元格。1987;50:453–463.-公共医学
    1. Anderson HA,Chen YZ,Norkin LC。结合猴病毒40转位到富含小窝蛋白的膜域,其进入受到选择性破坏小窝的药物的抑制。分子生物学细胞。1996;7:1825–1834.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Carbone R等人。Eps15和eps15R是内吞途径的重要组成部分。1997年癌症研究;57:5498–5504.-公共医学
    1. Stang E、Kartenbeck J、Parton RG。主要组织相容性复合体I类分子介导SV40与小窝的结合。分子生物学细胞。1997;8:47–57.-项目管理咨询公司-公共医学

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