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.2004年5月7日;279(19):20546-54.
doi:10.1074/jbc。M401259200。 Epub 2004年2月26日。

通过DNA损伤下调鞘氨醇激酶-1:对蛋白酶和p53的依赖

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通过DNA损伤下调鞘氨醇激酶-1:对蛋白酶和p53的依赖

塔里克·A·塔哈等。 生物化学杂志. .
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摘要

鞘氨醇激酶1(SK1)是合成1-磷酸鞘氨醇(S1P)的关键酶,调节细胞行为的各个方面,包括细胞生存和增殖。DNA损伤的抗肿瘤药物已被证明可诱导p53、神经酰胺水平和细胞凋亡;然而,抗肿瘤药物对SK的影响尚未评估。在本研究中,我们研究了DNA损伤剂放线菌素D(Act D)对鞘氨醇激酶(SK1)功能的影响。如Western blot分析所示,D作用导致SK1蛋白水平降低,同时SK活性也随之降低。下调是转录后的,因为SK1的mRNA水平保持不变。其他DNA损伤剂如阿霉素、足叶乙甙和γ射线照射也观察到SK1蛋白的类似减少。胰蛋白酶抑制剂ZVAD和Bcl-2取消了Act D对SK1的作用,表明Bcl-2下游半胱氨酸蛋白酶在SK1下调中的作用。抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、6、7和9只能部分逆转Act D诱导的SK1丢失。组织蛋白酶B(一种溶酶体蛋白酶)的抑制通过D作用显著逆转了SK1的下降,表明Bcl-2下游的大量ZVAD敏感性半胱氨酸蛋白酶介导了SK1下降。当ActD治疗后p53上调被抑制时,SK1下调被挽救,表明SK1调节的p53依赖性。用SK1的产物S1P处理细胞,部分抑制了Act D诱导的细胞死亡,增加了SK1减少可能是细胞死亡发生的部分必要条件的可能性。此外,MCF-7细胞中小干扰RNA敲低SK1导致细胞活力显著降低。这些研究表明,SK1被基因毒性应激下调,SK1的基本功能可能是维持肿瘤细胞生长所必需的。

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