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.2004年2月;78(4):2029-36.
doi:10.1128/jvi.78.4.2029-2036.2004。

人类1型副流感病毒L聚合酶蛋白中两个位置的密码子替换突变产生的病毒在体内具有衰减谱,在体外具有更高的表型稳定性

附属公司

人类副流感病毒1型L聚合酶蛋白两个位置的密码子取代突变产生的病毒在体内具有衰减谱,在体外具有增加的表型稳定性

约瑟芬·M·麦考利夫等。 J维罗尔. 2004年2月.

摘要

先前在HPIV3cp45候选疫苗的L聚合酶中发现的Y942H和L992F温度敏感(ts)和减弱氨基酸替代突变被引入重组人副流感病毒1型(rHPIV1)的L聚聚酶的同源位置。在rHPIV1中,Y942H突变指定了体外的ts表型和仓鼠的衰减(att)表型,而L992F突变指定了这两种表型。这些密码子突变中的每一个都是由单核苷酸替换产生的,因此有可能很容易还原为指定野生型氨基酸残基的密码子。我们引入了密码子942或992的替代氨基酸分配,作为提高遗传稳定性和产生具有一定衰减范围的突变体的策略。23个在L蛋白942或992位有密码子取代的重组体是可行的。与亲本Y942H病毒相比,一种高度ts和att突变体Y942A病毒与编码野生型酪氨酸的密码子相差三个核苷酸,在限制性温度下体外连续传代时也具有高水平的遗传和表型稳定性,具有单核苷酸替代。与L992F病毒相比,我们获得了在992位具有替换的突变体,该突变体具有ts和att表型。这些发现确定了使用替代密码子替换突变作为一种方法,可用于产生具有更高遗传稳定性和/或改良衰减水平的候选疫苗病毒。

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