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2004年1月30日;279(5):3578-87.
doi:10.1074/jbc。M308347200。 Epub 2003年10月27日。

选择性破坏HeLa细胞中的溶酶体触发由多个木瓜蛋白酶样溶酶体组织蛋白酶裂解Bid介导的凋亡

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选择性破坏HeLa细胞中的溶酶体触发由多个木瓜蛋白酶样溶酶体组织蛋白酶裂解Bid介导的凋亡

蒂娜·西尔曼等。 生物化学杂志
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摘要

越来越多的证据表明溶酶体蛋白酶积极参与细胞凋亡。以HeLa细胞为模型系统,我们表明L-亮氨酸-L-亮氨酸甲酯选择性破坏溶酶体导致细胞凋亡,其特征是溶酶体蛋白酶移位到胞浆中,并通过分裂促凋亡的Bcl-2家族成员Bid。细胞凋亡和Bid分裂,15μM L-反式环氧琥珀酸(OEt)-亮氨酸-3-甲基丁酰胺(一种木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶抑制剂)可以阻止溶酶体蛋白酶向胞浆的移位。用15微米N-苯甲酰氧羰基-VAD-氟甲基酮培养细胞可阻止细胞凋亡,但不能阻止Bid裂解,这表明组织蛋白酶介导的细胞凋亡是caspase依赖性的。在中性pH下进行的体外实验表明,木瓜蛋白酶样组织蛋白酶B、H、L、S和K主要在Arg(65)或Arg(71)处裂解Bid。组织蛋白酶C和X或天冬氨酸蛋白酶组织蛋白酶D未观察到Bid裂解。组织蛋白酶B、H、L和S处理的全长Bid孵育后,可从分离的线粒体中快速释放细胞色素C。因此,Bid可能是溶酶体破坏诱导凋亡的重要介体。

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