Characterization and pathogenic significance of Vibrio vulnificus antigens preferentially expressed in septicemic patients

doi:10.1128/IAI.71.10.5461-5471.2003

.2003年10月；71(10):5461-71.

doi:10.1128/IAI.71.10.5461-5471.2003。

败血症患者中优先表达的创伤弧菌抗原的特征及其致病意义

年轻的冉·金¹, 希恩·李, Choon Mee Kim先生, 金秀英（Soo Young Kim）, 恩敬信, 董孝信（Dong Hyeon Shin）, 孙思忠, Hyon E Choy公司, Ann Progulske-框, 杰弗里·德·希尔曼, 马丁·汉德菲尔德, Joon Haeng Rhee先生

附属公司

PMID： 14500463
预防性维修识别码：项目编号：C201039
内政部： 10.1128/IAI.71.10.5461-5471.2003

败血症患者中优先表达的创伤弧菌抗原的特征及其致病意义

年轻的冉·金等。感染免疫. 2003年10月.

.2003年10月；71(10):5461-71.

doi:10.128/IAI.71.10.5461-5471.2003。

作者

年轻的冉·金¹, 希恩·李, Choon Mee Kim先生, 金秀英（Soo Young Kim）, 恩敬信, 董孝信（Dong Hyeon Shin）, 孙思忠, 蔡贤娥, Ann Progulske-框, 杰弗里·德·希尔曼, 马丁·汉德菲尔德, Joon Haeng Rhee先生

附属

¹韩国光州东区Hak-Dong 5号韩国国立大学医学院肠道致病菌基因组研究中心弧菌感染研究所分子微生物致病性国家研究实验室，邮编501-746。

PMID： 14500463
预防性维修识别码：项目编号：C201039
内政部： 10.1128/IAI.71.10.5461-5471.2003

摘要

病原菌的许多重要毒力基因在体内优先表达。我们使用最近开发的体内诱导抗原技术（IVIAT）来鉴定体内诱导的创伤弧菌基因。通过菌落印迹分析，利用在体外表达的创伤弧菌全细胞和裂解液中完全吸附的混合恢复期血清筛选创伤弧菌表达文库。选择了12个克隆，并对插入的DNA序列进行了分析。DNA序列显示出与编码具有不同功能蛋白质的基因的同源性：这些功能包括趋化性（一种甲基受体趋化蛋白）、信号传递（一种含GGDEF的蛋白质和一种假定的丝氨酸/苏氨酸激酶）、生物合成和代谢（PyrH、PurH和IlvC）、，分泌（TatB和质粒无色杆菌分泌[PAS]因子）、转录激活（IlvY和HlyU）和假定脂蛋白（YaeC）的活性。此外，一个识别出的开放阅读框编码了一个假想的蛋白质。构建12个在体表达（ive）基因的等基因突变体，并测试其细胞毒性。通过HeLa细胞释放的乳酸脱氢酶测定突变菌株的细胞毒性，在吡咯H、purH和hlyU突变株中几乎被消除。在这三个突变体中，小鼠的50%致死剂量增加了约10至50倍。PyrH和PurH似乎对体内生长至关重要。HlyU似乎是体内毒力表达的主要调节因子之一。本研究成功鉴定了与体内细菌毒力有关的ive基因，证明了IVIAT在检测新毒力基因方面的有用性。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
IVIAT公司。存活患者的恢复期血清*创伤弧菌*将败血症与体外培养的毒力临床分离物（CMCP98K）混合并彻底吸附（步骤1）。的表达式库*创伤弧菌*CMCP98K生成于*大肠杆菌*BL21（DE3）（第2步），用吸附血清探测克隆（第3步）。正在生成的反应性克隆*创伤弧菌*纯化了在败血症感染期间表达但在体外培养期间未表达的抗原，并对其克隆DNA进行了测序。活体表达(*独立的*)基因在GenBank细菌基因组数据库中进行全长鉴定，并通过PCR进行克隆（步骤4）。病毒的致病作用五通过测试每个基因的空突变体的表型来研究基因产物（步骤5）。

**图2。**
筛选过程的一个示例，用于确认候选基因产物与合并的恢复期血清发生特异性反应。采集初级筛板（A）上的反应性克隆，转移到96 well培养板上，并将复制品镀到IPTG-KAN-BHI琼脂板上进行二次筛分（B）。一名从未吃过生贝类的13岁女孩的血清被体外表达的*创伤弧菌*用作阴性对照。（C）每个克隆都进行了两次或三次测试。NEG和CON，分别为阴性和合并的恢复期血清。箭头表示阳性克隆。

**图3。**
的影响五基因突变对细胞毒性的影响*创伤弧菌。*细菌细胞与HeLa细胞在100的MOI下孵育90分钟。条形图表示四个孔中LDH的平均释放百分比。WT代表*创伤弧菌*WT MO6-24/O和CMCP6。从CMM1701到CMM1712的菌株分别代表五本研究中确定的基因（见表1和表3）。仅限的*吡咯烷酮*,*purH（purH）*、和*hlyU公司*突变体的细胞毒性在统计学上显著降低。星号表示统计显著性(*P（P）*<0.001）由学生确定t吨测试。

**图4。**
的影响*hlyU公司*突变对HeLa细胞的细胞毒性。对数期细菌细胞与HeLa细胞在MOI 100下孵育90分钟。条形代表四个孔中LDH的平均释放百分比。细胞毒性缺陷*hlyU公司*突变体（CMM1710）在补体菌株（CMM171 5）中几乎完全补体。星号表示统计显著性(*P（P）*<0.001）由学生确定t吨测试。

**图5。**
增长五HeLa细胞裂解物中显示毒性降低的基因突变。突变株*吡咯烷酮*,*hlyU公司*、和*purH（purH）*将同源物接种到2.5%NaCl HI（A）、DMEM（B）和HeLa细胞裂解液（C）中，然后在37°C的5%CO中培养3h₂孵化器。每1小时在2.5%NaCl HI琼脂平板上计数活细胞。将HI肉汤、DMEM和HeLa裂解液中的突变体生长与适当的等基因WT菌株MO6-24/O进行比较(*吡咯烷酮*和*hlyU公司*)或CMCP6(*purH（purH）*). 误差条表示三次试验平均值的标准误差。

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1. Aldridge，P.和U.Jenal。1999.鞭毛运动部件的细胞周期依赖性降解需要一种新型响应调节器。摩尔微生物。32:379-391.-公共医学
1. Ausmees，N.、R.Mayer、H.Weinhouse、G.Volman、D.Amikam、M.Benziman和M.Lindberg，2001年。遗传数据表明，含有GGDEF结构域的蛋白质具有二鸟苷酸环化酶活性。FEMS微生物。莱特。204:163-167.-公共医学
1. 贝特曼、A.、E.伯尼、R.杜宾、S.R.埃迪、R.D.芬恩和E.L.桑纳默。1999年。Pfam 3.1:1313多重比对和剖面HMM匹配大多数蛋白质。核酸研究27:260-262。-项目管理咨询公司-公共医学
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[3] Ausmees，N.、R.Mayer、H.Weinhouse、G.Volman、D.Amikam、M.Benziman和M.Lindberg，2001年。遗传数据表明，含有GGDEF结构域的蛋白质具有二鸟苷酸环化酶活性。FEMS微生物。莱特。204:163-167.-公共医学

[4] Ausmees，N.、R.Mayer、H.Weinhouse、G.Volman、D.Amikam、M.Benziman和M.Lindberg，2001年。遗传数据表明，含有GGDEF结构域的蛋白质具有二鸟苷酸环化酶活性。FEMS微生物。莱特。204:163-167.-公共医学

[5] 贝特曼、A.、E.伯尼、R.杜宾、S.R.埃迪、R.D.芬恩和E.L.桑纳默。1999年。Pfam 3.1:1313多重比对和剖面HMM匹配大多数蛋白质。核酸研究27:260-262。-项目管理咨询公司-公共医学

[6] 贝特曼、A.、E.伯尼、R.杜宾、S.R.埃迪、R.D.芬恩和E.L.桑纳默。1999年。Pfam 3.1:1313多重比对和剖面HMM匹配大多数蛋白质。核酸研究27:260-262。-项目管理咨询公司-公共医学

[7] 卑诗省伯克斯、F.萨金特和T.帕尔默。2000.Tat蛋白出口途径。摩尔微生物。35:260-274.-公共医学

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[9] 布莱尔，D.F.，1995年。细菌是如何感知和游动的。每年。微生物评论。49:489-522.-公共医学

[10] 布莱尔，D.F.，1995年。细菌是如何感知和游动的。每年。微生物评论。49:489-522.-公共医学

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