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.1992年11月;119(3):493-501。
doi:10.1083/jcb.119.3.493。

通过特异性标记细胞核DNA片段鉴定原位程序性细胞死亡

附属机构

核DNA片段特异性标记原位识别程序性细胞死亡

Y加夫列利等人。 J细胞生物学. 1992年11月.

摘要

程序性细胞死亡(PCD)在发育生物学和维持组织持续更新的稳态中起着关键作用。目前,它的存在主要是通过混合DNA提取物的凝胶电泳推断出来的,因为PCD被证明与DNA断裂有关。基于这一观察,我们在这里描述了一种在单细胞水平原位显示PCD的方法的发展,同时保留了组织结构。常规组织切片经蛋白酶预处理后,用生物素化聚dU标记缺口端,用末端脱氧转移酶导入,然后用亲和素结合过氧化物酶染色。反应是特异性的,只有位于PCD预期位置的细胞核被染色。初步筛查包括:小肠和大肠、表皮、淋巴组织、卵巢和其他器官。一项详细的分析表明,该过程是在核外围启动的,时间相对较短(从启动到细胞消除的1-3小时),PCD出现在成簇的组织中。该方法显示的组织-PCD的范围远大于核形态学检测到的细胞凋亡,从而为各种研究开辟了道路。

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引用人

工具书类

    1. 生物化学细胞生物学。1990年9月;68(9):1071-4-公共医学
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