Relative role of the glutaminase, glutamate dehydrogenase, and AMP-deaminase pathways in hepatic ureagenesis: studies with 15N

doi:10.1016/0003-9861(92)90008-k

.1992年2月1日；292(2):393-401.

doi:10.1016/0003-9861（92）90008-k。

谷氨酰胺酶、谷氨酸脱氢酶和AMP-脱氨酶途径在肝尿素生成中的相对作用：15N研究

I尼西姆¹, C卡塔诺, I尼西姆, M尤德科夫

附属公司

PMID： 1346240
内政部： 10.1016/0003-9861（92）90008-k

免费文章

谷氨酰胺酶、谷氨酸脱氢酶和AMP-脱氨酶途径在肝尿素生成中的相对作用：15N研究

I尼西姆等。 Arch Biochem生物物理. 1992.

免费文章

.1992年2月1日；292(2):393-401.

doi:10.1016/0003-9861（92）90008-k。

作者

I尼西姆¹, C卡塔诺, I尼西姆, M尤德科夫

附属

¹宾夕法尼亚州费城儿童医院生化发育和分子疾病科。

PMID： 1346240
内政部： 10.1016/0003-9861（92）90008-k

摘要

我们研究了谷氨酰胺酶与谷氨酸脱氢酶（GLDH）和嘌呤核苷酸循环（PNC）通路在为尿素合成提供氨中的相对作用。将分离的大鼠肝细胞在pH 7.4和37℃的Krebs缓冲液中孵育，缓冲液中添加0.1 mM L-鸟氨酸和1 mM[2-15N]谷氨酰胺、[5-15N]谷氨酸、[15N]天冬氨酸或[15N'谷氨酸，作为唯一的标记氮源，存在或不存在1 mM氨基氧乙酸盐（AOA）。在含有15N标记前体和额外19个未标记氨基酸的培养基中进行一系列单独的培养，浓度与大鼠血浆浓度相似。利用GC-MS测定前体产物关系和15N标记底物对15NH3、腺嘌呤核苷酸的6-氨基（[6-15NH2]腺嘌呤）、15N氨基酸和[15N]尿素的通量。用[15N]天冬氨酸孵育40分钟后，单标记和双标记尿素的同位素富集分别为70和20原子%过剩；对于单标记和双标记尿素，使用[15N]谷氨酸时，这些值分别超出约65和约30个原子%。在以[15N]天冬氨酸作为唯一底物的实验中，15NH3的富集程度超过了[6-NH2]腺嘌呤，这表明[6-15NH2]的腺嘌呤）不可能是15NH3主要的前体。添加AOA抑制了[15N]天冬氨酸形成[15N]-谷氨酸、15NH3和双标记尿素。然而，AOA对[6-15NH2]腺嘌呤的生成几乎没有影响。在[15N]谷氨酸的实验中，AOA抑制[15N]-天冬氨酸和双标记尿素的形成，而15NH3的形成增加。在存在生理氨基酸混合物的情况下，[15N]谷氨酸对尿素氮的贡献小于5%。相比之下，无论培养基如何，谷氨酰胺的酰胺和氨基氮对尿素氮总量的贡献约为65%。目前的数据表明，当谷氨酸是唯一的底物时，通过GLDH的通量在为尿素合成提供NH3方面比通过PNC的通量更为突出。然而，在含有大鼠肝脏在体内利用的氨基酸混合物的培养基的实验中，通过GLDH或PNC获得的NH3分数与通过谷氨酰胺酶途径获得的氨含量相比微不足道。因此，目前的数据表明，通过谷氨酰胺酶从谷氨酰胺的5-N中获得的氨是肝脏尿素生成的主要氮源。

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