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.2003年5月15日;65(10):1685-90.
doi:10.1016/s0006-2952(03)00150-3。

重组小鼠视网膜脱氢酶1型的酶学特性

附属公司

重组小鼠视网膜脱氢酶1型的酶学特性

伊莎贝尔·加格农等。 生物化学药理学. .

摘要

视网膜脱氢酶(RALDHs)将视网膜转化为视黄酸(RAs),视黄酸是胚胎发生和组织分化中的重要信号分子。我们在大肠杆菌中表达了小鼠RALDH 1型(mRALDH1),并研究了重组酶对视网膜底物的动力学特性。纯化的重组mRALDH1催化了全反式和9-顺式视网膜的氧化,但不催化13-顺式视网膜,并且显示了两个pH值的最佳值,分别为7.8和9.4。全反式视网膜(11.6微米)的K(m)是9顺式视网膜(3.59微米)的3倍。然而,全反式或9-顺式视网膜对各自RA的转换效率相似。MgCl(2)抑制全反式和9-顺式视网膜的氧化。水合氯醛和乙醛竞争性地抑制了全视网膜氧化,抑制常数(K(i))分别为4.99和49.4 micro M。另一方面,视黄醇毫无竞争力地阻止了反应。这些数据扩展了mRALDH1的动力学特征,为该酶在RA生物生成中的可能作用提供了见解,并应为测定在全反式和9-顺式视网膜催化中起关键作用的氨基酸残基提供有用的信息。

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