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.2003年4月18日；278(16):13775-83.

doi:10.1074/jbc。M212262200。 Epub 2003年2月3日。

哺乳动物中性鞘磷脂酶2的生化特性及其在鞘磷脂代谢中的作用

诺玛·马切西尼¹, 奇亚拉·卢贝托, 优素福·汉农

附属机构

PMID： 12566438
内政部： 10.1074/jbc。M212262200号

免费文章

哺乳动物中性鞘磷脂酶2的生化特性及其在鞘磷脂代谢中的作用

诺玛·马切西尼等。生物化学杂志. 2003.

免费文章

.2003年4月18日；278(16):13775-83.

doi:10.1074/jbc。M212262200。 Epub 2003年2月3日。

作者

诺玛·马切西尼¹, 奇亚拉·卢贝托, 优素福·A·汉农

附属

¹南卡罗来纳医科大学生物化学和分子生物学系，美国查尔斯顿29425。

PMID： 12566438
内政部： 10.1074/jbc。M212262200号

摘要

中性鞘磷脂酶（N-SMase）是参与神经酰胺生成的关键酶之一；然而，哺乳动物N-SMase的编码基因仍不明确。先前对克隆的nSMase1的研究表明，该蛋白主要作为溶血血小板活化因子-磷脂酶C发挥作用。最近，有报道克隆了另一种推测的N-SMase，即nSMase2。在本研究中，使用酵母细胞中过度表达的蛋白质对小鼠nSMase2进行生化表征，其中肌醇磷酸鞘脂磷脂酶C（Isc1p）被删除。N-SMase活性依赖于Mg（2+），被磷脂酰丝氨酸激活，被GW4869抑制。通过在MCF7细胞中过度表达nSMase2来研究nSMase1识别内源性鞘磷脂（SM）作为底物的能力。质量测量表明，在过度表达细胞中SM水平降低了40%，标记研究表明，nSMase2加速了SM分解代谢。因此，神经酰胺测量显示，与载体转染的MCF7相比，过度表达nSMase2的细胞增加了60+/-15%。接下来研究nSMase2在细胞生长中的作用。nSMase2的稳定过度表达导致指数晚期生长速度下降30-40%。此外，肿瘤坏死因子在过度表达该酶的MCF7细胞中诱导约50%的nSMase2活化，表明nSMase是一种肿瘤坏死因子反应酶。总之，这些结果1）表明nSMase2是nSMase的一个结构基因，2）表明nSMase2在细胞中起着真正的N-SMase作用，3）暗示nSMase1参与细胞生长和细胞信号的调节。

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