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.2003年3月15日;370(第3部分):901-12。
doi:10.1042/BJ20021420。

催化域限制蛋白激酶Cα的移位,以响应Ca2+和二酰甘油的增加

附属公司

催化域限制蛋白激酶Cα的移位,以响应Ca2+和二酰甘油的增加

阿拉提·拉古纳(Arathi Raghunath)等。 生物化学杂志. .

摘要

用共聚焦显微镜研究了活神经母细胞瘤细胞中融合到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的蛋白激酶C(PKC)α、βII、δ和ε的易位。卡巴胆碱可诱导大多数细胞中PKCα-EGFP和β-II-EGFP的瞬时易位,少数细胞中PKC-delta-EGFP的暂时易位,并诱导PKCε-EGFP持续易位。为了监测同一细胞内Ca(2+)和二酰甘油的水平以及PKC的移位,将Ca(2+)敏感C2结构域、二酰甘油敏感C1结构域和全长PKC分别融合到红色、蓝色和黄色荧光蛋白上。PKC-α在C2结构域后几秒钟移位,这表示Ca(2+)增加。这种延迟对PKC-α中假底物的去除不敏感,但分离的调控域与C2域同时移位。PKCε的转运与二酰甘油的增加相一致。离子霉素诱导PKC-α和C2结构域的易位,而1,2-二辛基甘油导致C1结构域和PKC-ε的易位。对单个C1结构域的实验表明,卡巴胆碱或佛波醇12,13-二丁酸盐处理可诱导PKC-α-C1a、PKC-εC1a和PKC-β-C1b的易位,而PKC-γ-C1b对这些药物基本不敏感。与全长PKCα相比,PKCα和假底物变性PKCα的调节域对卡巴胆碱刺激的二酰基甘油增加作出反应。

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    1. 欧洲细胞生物学杂志。1995年4月;66(4):324-34-公共医学
    1. 欧洲药理学杂志。1994年6月15日;268(1):19-28-公共医学
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