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.2003年1月3日;278(1):636-44.
doi:10.1074/jbc。M209988200。 Epub 2002年10月25日。

选择性剪接5'-非翻译区先导外显子对人神经元一氧化氮合酶的翻译调控

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选择性剪接5'-非翻译区先导外显子对人神经元一氧化氮合酶的翻译调控

德里克·牛顿等。 生物化学杂志. .
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摘要

神经元一氧化氮合酶(nNOS)mRNA的表达受到复杂的细胞特异性转录调控,这是由选择性启动子介导的。出乎意料的是,我们发现了一个89核苷酸交替剪接的外显子,位于外显子1变异体和包含翻译起始密码子的普通外显子2之间的5’-非翻译区。不影响开放阅读框架的选择性剪接事件在哺乳动物中非常罕见;因此,我们评估了其功能相关性。在多种细胞类型中进行的报告RNA瞬时转染显示,这种选择性剪接外显子作为一种有效的翻译阻遏物。稳定转染的细胞株证实,交替剪接的外显子抑制了天然nNOS开放阅读框的翻译。逆转录PCR和RNase保护分析表明,含有该外显子的nNOS mRNA是常见的,并且以启动子特异性和组织限制性的方式表达。突变分析确定了这个新外显子中的功能性顺式元件,二级结构预测显示它形成了一个假定的干环。RNA电泳迁移率变化分析技术显示,一种特定的细胞质RNA-结合复合体与该基序相互作用。因此,证明了5’-未翻译区域内的独特剪接事件引入了翻译控制元素。这代表了一种新的哺乳动物mRNA翻译控制模型。

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