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2002年7月23日;12(14):1251-5.
doi:10.1016/s0960-9822(02)00973-9。

与ILK和PDK1不同的质膜Raft相关PKB Ser473激酶活性的鉴定

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与ILK和PDK1不同的质膜Raft相关PKB Ser473激酶活性的鉴定

米歇尔·希尔等。 当前生物
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摘要

蛋白激酶B(PKB/Akt)已被公认为一种重要的信号转导中间体,其失调与人类癌症和糖尿病的发生有关(综述见)。PKB的完全激活需要对残基Thr308和Ser473进行磷酸化。虽然Thr308激酶被称为3-磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1),已被广泛表征(见综述),但Ser473激酶的身份仍不清楚。我们将研究重点放在质膜(PM)部分,因为膜定位足以激活PKB,这表明PKB上游激酶在膜上具有组成性活性。在这里,我们报告了一种组分活性PKB Ser473激酶活性的鉴定,该激酶富含漂浮的、不溶于洗涤剂的质膜筏,与PKB和PDK1的细胞溶质分布不同。这种Ser473激酶活性通过高盐从膜中释放出来,凝胶过滤分析表明,负责的激酶存在于大于500 kDa的大络合物中。在部分纯化的PKB Ser473激酶制剂中检测到两种主要的磷酸蛋白和整合素连接激酶(ILK)。然而,与之前的观察相比,ILK免疫沉淀物没有保留Ser473激酶活性。因此,我们发现了一种新的与筏相关的PKB Ser473激酶,它与脂筏在PKB信号传导中的作用有关。

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