跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2002年8月；22(16):5761-8.
doi:10.1128/MCB.22.16.5761-578.2002。

小鼠Mekk2的破坏揭示了Mekk2在调节T细胞受体信号转导中的意外作用

所之郭子建 1, 加文·克莱德斯代尔, 金科诚, Kihwan Kim先生, 林甘, 大卫·J·麦康基, 斯蒂芬·E·乌尔里希, 袁庄, 苏冰冰（Bing Su）
附属公司

小鼠Mekk2的破坏揭示了Mekk2在调节T细胞受体信号转导中的意外作用

所之郭子建等。 分子细胞生物学. 2002年8月.

摘要

MEKK2是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶基因家族的成员，参与调节多种MAPK信号通路。为了阐明MEKK2的体内功能，我们制作了携带MEKK2基因座靶向突变的小鼠。Mekk2（-/-）小鼠是可存活和可繁殖的。Mekk2缺乏小鼠的胸腺和脾脏T细胞的主要亚群与野生型小鼠的没有区别。在Mekk2缺乏小鼠和野生型小鼠的骨髓中，B细胞的发育过程类似。然而，在抗CD3单克隆抗体（MAb）刺激下，Mekk2（-/-）T细胞增殖增强，这些T细胞比野生型T细胞产生更多的白细胞介素2和γ干扰素，表明Mekk2可能参与控制T细胞受体（TCR）信号的强度。一直以来，Mekk2（-/-）胸腺细胞比野生型胸腺细胞更容易受到抗CD3 MAb诱导的细胞死亡的影响。此外，TCR介导的c-Jun N末端激酶激活在Mekk2（-/-）T细胞中未被阻断，但适度增强。Mekk2（-/-）T细胞中细胞外信号调节激酶和p38 MAPK激活均不受影响。总之，我们发现可能需要MEKK2来控制TCR/CD3信号的强度。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
小鼠的靶向突变Mekk2公司基因。（A） 针对Mekk2公司轨迹。老鼠Mekk2公司显示了MEKK2催化结构域中编码氨基酸349至438的基因组DNA外显子（黑箱）（顶面板）。靶向载体显示在中间面板中，靶向等位基因显示在底部面板中。全新14-kb巴姆显示由目标事件创建的HI片段。打开的盒子是Hin公司dIII片段用作Southern杂交基因分型探针。P1、P2和P3是用于基因分型的三个引物。pBS、pBluescript。（B） 野生型和靶向ES细胞基因组DNA的Southern blot分析Hin公司dIII碎片作为探针（见面板a）。（C） 一窝猪的PCR基因分型Mekk2公司+/−父母。（D） MEKK2蛋白表达的IP-Western-blot（WB）分析。从100 mg大脑、肾脏、胸腺（Thy）和脾脏（Spl）或10 mg7从野生型、，Mekk2公司+/−，或Mekk2公司−/−小鼠，用对照兔血清或抗MEKK2抗血清1128进行IP。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离免疫复合物，并用抗MEKK2抗血清1129进行Western blotting分析。免疫前血清；注意，非特异性带。
图2。
图2。
正常T细胞和B细胞发育不需要MEKK2。所示为流式细胞术分析野生型和Mekk2公司−/−胸腺、脾脏和骨髓。显示了分析中使用的抗体。每个配置文件中的数字是总细胞数的百分比。方框R3、R4和R5中显示的细胞分别为B前细胞、B前细胞和B前细胞以及成熟细胞。
图3。
图3。
野生型（WT）和Mekk2公司−/−T细胞。（A和B）纯化4-8周龄野生型和Mekk2公司−/−分别用抗CD3抗体（A）和抗CD3+抗CD28抗体（B）刺激小鼠48小时[三H] 在采集细胞用于测量[三H] 胸腺嘧啶掺入。（C至G）从4-8周龄野生型和Mekk2公司−/−用抗CD3抗体刺激小鼠24 h，用ELISA法测定细胞因子IL-2（C）、IFN-γ（D）、IL-4（E）、IL-5（F）和IL-10（G）的产生。如上所述测量胸腺T细胞中IL-10（H）的产生。
图4。
图4。
敏感性Mekk2公司-缺乏胸腺细胞导致由细胞活化或应激引起的细胞死亡。（A） 野生型小鼠（8周龄）和Mekk2公司−/−小鼠腹腔注射100μg对照IgG或抗CD3抗体。18小时后处死小鼠，用PI染色法分析胸腺细胞。显示了亚二倍体细胞的百分比。（B） 野生型或Mekk2公司−/−从8周龄的小鼠中制备胸腺细胞；用抗CD3抗体刺激0、12和24小时；然后用藻红蛋白-抗CD4、细胞色素-抗CD8和FITC-膜联蛋白V进行三色流式细胞术染色监测。所示百分比为背景值减去后（膜联蛋白Ⅴ+未经刺激培养的胸腺细胞）。（C至E）野生型和Mekk2公司−/−用紫外线（60 J/m）刺激从8周龄同窝婴儿中分离的胸腺细胞2)（C）、50 nM地塞米松（D）或0.5μg抗Fas/ml（E）在不同时间点，然后按照B组所述进行凋亡检测。
图5：。
图5：。
抗CD3抗体刺激对JNK-MAPK的高激活作用Mekk2公司−/−T细胞。由8周龄野生型（1、3和5道）和Mekk2公司−/−在检测JNK、ERK和p38激活之前，用对照抗体（第1和第2道）、抗CD3（第3和第4道）或抗CD3加抗CD28抗体（第5和第6道）刺激窝友30分钟。相对JNK、ERK和p38活性在归一化到蛋白质水平后以条形图表示。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • VEGF在缺乏C末端磷酸化的情况下刺激ERK5的激活，防止内皮细胞核定位并促进AKT激活。
    Mondru AK、Aljasir MA、Alrumayh A、Nithianandarajah GN、Ahmed K、Muller J、Goldring CEP、Wilm B、Cross MJ。 Mondru AK等人。 细胞。2023年3月22日；12（6）：967。doi:10.3390/cells12060967。 细胞。2023 PMID：36980305 免费PMC文章。
  • MEKK3-TGF-β串扰调节向内的动脉重塑。
    邓H，徐毅，胡X，庄ZW，张毅，王毅，恩托克A，施瓦茨MA，苏B，西蒙斯M。 邓H等。 美国国家科学院院刊2021年12月21日；118（51）：e2112625118。doi:10.1073/pnas.2112625118。 美国国家科学院院刊，2021年。 PMID：34911761 免费PMC文章。
  • 帕佐帕尼通过抑制MAP3K2和MAP3K3改善急性肺损伤。
    袁Q、巴西特A、梁W、瞿R、栾Y、任C、李A、徐X、刘X、杨C、郭A、皮尔斯R、张L、土耳其人B、胡X、李F、崔W、李R、黄D、莫L、塞萨·WC、李PJ、克鲁格Y、苏B、唐W、何J、吴D。 袁强等。 《科学与运输医学》，2021年4月28日；13（591）：eabc2499。doi:10.1126/scitranslmed.abc2499。 《科学与运输医学》，2021年。 PMID：33910977 免费PMC文章。
  • MAP3K2调节的肠基质细胞定义了一个独特的干细胞生态位。
    Wu N、Sun H、Zhao X、Zhang Y、Tan J、Qi Y、Wang Q、Ng M、刘Z、He L、Niu X、Chen L、Liu Z、Li HB、Zeng YA、Roulis M、Liu D、Cheng J、Zhou B、Ng LG、Zou D、Ye Y、Flavell RA、Ginhoux F、Su B。 吴恩等。 自然。2021年4月；592(7855):606-610. doi:10.1038/s41586-021-03283-y。电子出版2021年3月3日。 自然。2021 PMID：33658717
  • MEKK2在I型神经纤维瘤病中介导ERK异常激活。
    Bok S、Shin DY、Yallowitz AR、Eiseman M、Cung M、Xu R、Li N、Sun J、Williams AL、Scott JE、Su B、Shim JH、Greenblatt MB。 Bok S等人。 国家公社。2020年11月11日；11(1):5704. doi:10.1038/s41467-020-19555-6。 国家公社。2020 PMID：33177525 免费PMC文章。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Alberola-Ila，J.、K.A.Forbush、R.Seger、E.G.Krebs和R.M.Perlmutter。胸腺细胞分化中MAP激酶激活的选择性要求。自然373:620-623。-公共医学
    1. 布兰克、J.L.、P.格温、E.M.埃利奥特、S.萨瑟和G.L.约翰逊。1996.丝裂原活化蛋白/ERK激酶（MEKK）2和3的分子克隆。调控涉及丝裂原活化蛋白激酶和c-Jun激酶的顺序磷酸化途径。生物学杂志。化学。271:5361-5368.-公共医学
    1. Chen，Y.R.、C.F.Meyer和T.H.Tan。c-Jun N末端激酶1（JNK1）在γ辐射诱导的细胞凋亡中的持续激活。生物学杂志。化学。271:631-634之间。-公共医学
    1. Cheng，J.、J.Yang、Y.Xia、M.Karin和B.Su.2000年。MEK激酶2、c-Jun N-末端激酶（JNK）激酶2和JNK1的协同作用导致有效和特异性的JNK1激活。分子细胞。生物.20:2334-2342。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Crompton，T.、K.C.Gilmour和M.J.Owen。1996。MAP激酶途径控制从双阴性到双阳性胸腺细胞的分化。细胞86:243-251。-公共医学

出版物类型

MeSH术语