Oligomeric structure of the human immunodeficiency virus type 1 envelope protein on the virion surface

doi:10.1128/jvi.76.15.7863-7867.2002

.2002年8月；76（15）：7863-7。

doi:10.1128/jvi.76.15.7863-7867.2002。

病毒表面人类免疫缺陷病毒1型包膜蛋白的寡聚体结构

Rob J中心¹, 理查德·德利普曼, 雅各布·勒博维茨, 拉里·奥阿瑟, 帕特里夏·L·厄尔, 伯纳德·莫斯

附属公司

PMID： 12097599
预防性维修识别码：项目经理136379
DOI（操作界面）： 10.1128/jvi.76.15.7863-7867.2002年

病毒表面人类免疫缺陷病毒1型包膜蛋白的寡聚体结构

Rob J中心等。 J维罗尔. 2002年8月.

.2002年8月；76(15):7863-7.

doi:10.1128/jvi.76.15.7863-7867.2002。

作者

Rob J中心¹, 理查德·德利普曼, 雅各布·勒博维茨, 拉里·奥阿瑟, 帕特里夏·L·厄尔, 伯纳德·莫斯

附属

¹美国马里兰州贝塞斯达国立卫生研究院国家过敏和传染病研究所病毒病实验室，邮编：20892。

PMID： 12097599
预防性维修识别码：项目经理136379
DOI（操作界面）： 10.1128/jvi.76.15.7863-7867.2002年

摘要

人类免疫缺陷病毒1型的包膜蛋白（Env）在内质网中形成同源寡聚体。Env的寡聚体结构在高尔基体隔间中分裂后保持不变，并运输到受感染细胞的表面，在那里并入出芽病毒。在这里，我们使用生物物理技术评估融合激活前病毒相关环境的寡聚价。在洗涤剂提取之前，通过化学交联稳定病毒相关的Env低聚物，并通过免疫亲和色谱纯化。凝胶过滤显示出单一优势寡聚物物种，沉降平衡分析得出的质量值显示出三聚体结构。通过扫描透射电子显微镜测定单个Env分子的质量表明，与病毒粒子相关的Env是三聚的，并且在20%至30%的分子中观察到三角形形态。这些结果坚定地确立了人类免疫缺陷病毒病毒相关Env的寡聚体结构，与我们之前对猿猴免疫缺陷病毒Env的分析结果相类似。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
病毒衍生HIV-1环境的凝胶过滤分析。（A）将凝胶过滤部分的等分样品在还原剂存在下进行SDS-8%聚丙烯酰胺凝胶电泳（交联断裂），并用HIV-1 gp120特异性单克隆抗体、小鼠免疫球蛋白G特异性兔多克隆血清和碘化蛋白A进行顺序免疫印迹。gp120通过荧光屏放射自显影术定量。Blue Dextran 2000（给出空隙体积）在分数43中有一个洗脱峰。（插图）在存在还原剂和考马斯蓝染色的情况下，通过SDS-4至20%聚丙烯酰胺凝胶电泳分析48至51组分池。（B）在无还原剂（保持交联）的情况下，通过SDS-5%PAGE分析凝胶过滤部分的等分样品，并如上所述进行免疫印迹。面板A（插图）和B中的条表示250-kDa标记蛋白的电泳迁移率。

**图2。**
通过STEM图像的定量分析确定病毒粒子衍生的HIV-1Env的质量分布。所示为凝胶过滤组分48和49（a）池中795个分子和组分50和51（B）池中753个分子的分析结果。

**图3。**
病毒衍生HIV-1环境分子STEM图像的蒙太奇，呈现三角形形态。图示为混合凝胶过滤组分48和49的图像。平滑用于减少像素化。条形=50 nm。

**图4。**
病毒源性HIV-1环境单个凝胶过滤组分的沉降平衡浓度分布。实线显示了对四种不同转子速度下获得的数据进行全局建模后的最佳拟合分布。为清楚起见，仅显示了在7000 rpm转速下获得的数据。下面板显示了拟合线与实验数据的残差。

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1. Baker，K.A.、R.E.Dutch、R.A.Lamb和T.S.Jardetzky。副粘病毒介导的膜融合的结构基础。分子细胞3:309-319。-公共医学
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