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.2002年2月;22(1):15-22.
doi:10.1046/j.0106-9543.2001.01555.x。

利用杆状病毒载体向培养的原代大鼠和人肝星状细胞高效基因转移

附属公司

利用杆状病毒载体向培养的原代大鼠和人肝星状细胞高效基因转移

高润平等。 肝脏. 2002年2月.

摘要

背景/目的:当使用基于质粒的转染方法时,将基因转移到肝星状细胞(HSC)效率低下;因此,正在开发基于病毒的系统。杆状病毒系统最近已被证明可用于在哺乳动物细胞中表达基因。本研究的目的是确定杆状病毒载体是否可以感染和表达大鼠和人HSC中的靶基因,并评估感染的潜在细胞毒性和调节作用。

方法:使用携带LacZ基因的重组杆状病毒载体(AcCALacZ)感染HSC。β-半乳糖苷酶测定和电子显微镜用于确定感染效率和基因表达。台盼蓝阴性细胞计数用于评估感染的细胞毒性/细胞抑制作用。测量细胞蛋白质含量和α-平滑肌肌动蛋白表达,以评估杆状病毒对细胞功能/表型的影响。

结果:激活HSC的杆状病毒感染是高效的(>90%),并在没有细胞毒性、细胞抑制或调节作用的情况下提供长期LacZ基因表达(15天)。还观察到新分离的细胞感染,但感染水平较低(20%)。

结论:因此,杆状病毒载体可以在不对细胞功能产生不利影响的情况下,高效、长寿地将靶基因传递给培养的大鼠和人HSC。

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