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.2002年4月19日;277(16):13569-77.
doi:10.1074/jbc。M200062200。 Epub 2002年2月4日。

佛波醇衍生物激活TRPV4通道(hVRL-2/mTRP12)

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佛波醇衍生物激活TRPV4通道(hVRL-2/mTRP12)

渡边裕久等。 生物化学杂志. .
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摘要

我们研究了与人类VR-OAC、人类和小鼠OTRPC4通道高度同源的TRPV4通道、人类VRL-2和小鼠TRP12通道的佛波衍生物激活。在稳定转染人VRL-2(hVRL-2.1321N1)或瞬时转染小鼠TRP12的HEK-293细胞的1321N1细胞中,4alpha-Phorbol 12,13-二元酸(4alpha-PDD)诱导细胞内Ca(2+)浓度[Ca(2+)](i)增加,但在未转染或模拟转染细胞中没有。伴随着[Ca(2+)](i)的增加,4alpha-PDD激活了一个向外整流的阳离子通道,对于单价阳离子,其Eisenman IV渗透顺序为Ca(2+)-渗透,P(Ca)/P(Na)=5.8。福尔波12-肉豆蔻酸13-乙酸酯也诱导[Ca(2+)](i)增加,但其有效性约为4alpha-PDD的50倍。Ca(2+)增加和电流激活的EC(50)几乎相同(pEC(50,约6.7))。在新分离的内源性表达TRP12的小鼠主动脉内皮细胞中也观察到类似的作用。通过使用4alpha-PDD作为刺激TRP12的工具,我们表明该通道的激活受[Ca(2+)](i)的调节;增加[Ca(2+)](i)抑制IC(50)为406 nm的通道。浓度为1微米的钌红完全阻断-80 mV的内向电流,但对外向电流的影响较小,可能表明存在电压依赖性通道阻断。我们得出结论,佛波醇衍生物独立于蛋白激酶C激活TRPV4(VR-OAC、VRL-2、OTRPC4、TRP12),其激活方式与通道的直接激动剂门控一致。

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