A novel expression cassette of lyssavirus shows that the distantly related Mokola virus can rescue a defective rabies virus genome

doi:10.1128/jvi.76.4.2024-2027.2002

比较研究

.2002年2月；76(4):2024-7.

doi:10.1128/jvi.76.4.2024-2027.2002。

一种新的lyssavirus表达盒显示，亲缘关系较远的莫科拉病毒可以拯救有缺陷的狂犬病病毒基因组

菲利普·勒梅西耶¹, 伊夫·雅各布, 凯尔·坦纳, 诺埃尔·托尔多

附属机构

PMID： 11799201
预防性维修识别码：项目经理135871
DOI（操作界面）： 10.1128/jvi.76.4.2024-2027.2002年

比较研究

一种新的lyssavirus表达盒显示，亲缘关系较远的莫科拉病毒可以拯救有缺陷的狂犬病病毒基因组

菲利普·勒梅西耶等人。 J维罗尔. 2002年2月.

.2002年2月；76(4):2024-7.

doi:10.1128/jvi.76.4.2024-2027.2002。

作者

菲利普·勒梅西耶¹, 伊夫·雅各布, 凯尔·坦纳, 诺埃尔·托尔多

附属

¹法国巴黎Cédex 15巴斯德研究所Lyssavirus实验室，邮编75724。Philippe.LeMercier@medecine.unige.ch

PMID： 11799201
预防性维修识别码：项目经理135871
DOI（操作界面）： 10.1128/jvi.76.4.2024-2027.2002年

摘要

通过比较狂犬病病毒（Rv）微基因组的三种表达载体，我们表明，尽管Rv RNA对复制不是至关重要的，但其特性对于有效拯救非常重要。此外，我们还表明，来自辅助性Rv和Mokola病毒的病毒蛋白的共表达可以拯救Rv小基因组，而与Rv相关的欧洲蝙蝠lyssavirus 1则不能，这表明控制转录和复制的信号在远相关的Rv和Monkola病毒中是保守的。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
（A） Rv微基因组构建。由于所有结构都编码一个负链Rv小基因组，所以前导序列和尾序列被颠倒了。转录和核酶裂解后产生的RNA突出。（B）核酶序列和二级结构显示在荧光素酶基因已被克隆的负链微基因组两侧。灰色方框表示在HdvRz中突变以插入*Sma公司*I限制站点。

**图2。**
在体外转录小基因组编码载体。产品在6%的丙烯酰胺凝胶上迁移，该凝胶用溴化乙锭着色。这些小草图代表了以下解理产物：H，HamRz；M、小基因组；D、 HdvRz公司。显示碎片大小。

**图3。**
载体pDI。GGG，pDI。火腿和pDI。Mut被Rv救了出来。感染多重性（MOI）为0实际上是阴性对照。结果代表了四个实验中报告基因的平均表达。荧光素酶活性以每秒闪烁次数表示。（A）转染24小时后细胞提取物中的荧光素酶活性。（B）通道；新鲜细胞感染前板上清液24h后，细胞提取物中的荧光素酶活性。（C）救援完全使用克隆的cDNA进行。用表达T7RNAP的痘苗病毒感染BHK-21细胞。感染后1小时，在T7RNAP启动子的控制下，将小基因组表达载体与编码N、P、M、G和L蛋白的质粒一起转染。感染后24小时，用上清液感染新鲜细胞。然后，在孵育24小时后，测量荧光素酶活性。

**图4。**
通过Rv PV、Mokola病毒和EBL-1拯救Rv小基因组。细胞以1的感染倍数感染每种病毒，但阴性对照除外，其细胞未被感染。灰色条表示四个实验的平均报告基因表达。细胞提取物中的荧光素酶活性以每秒闪烁次数表示。（A）转染24小时后收集细胞提取物中的荧光素酶活性。（B）通道；实验A上清液感染后24小时细胞提取物中的荧光素酶活性。

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