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.2001年12月;281(6):G1340-7。
doi:10.1152/ajpgi.2001.281.6.G1340。

谷氨酰胺剥夺对培养的人肠细胞模型蛋白质合成的影响

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谷氨酰胺剥夺对培养的人肠细胞模型蛋白质合成的影响

O勒巴克尔等。 美国生理学杂志胃肠道肝脏生理学. 2001年12月.
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摘要

为了评估谷氨酰胺可用性对人类肠细胞蛋白质合成速率的影响,Caco-2细胞生长至分化,然后接受无谷氨酰胺培养基或蛋氨酸亚砜胺[L-S-[3-氨基-3-羧基丙基]-S-甲基亚砜氨(MSO)]产生的谷氨酰胺剥夺,谷氨酰胺合成酶抑制剂。然后用(2)H(3)标记的亮氨酸(含或不含谷氨酰胺)孵育细胞,通过气相色谱-质谱法测量(2)H-(3)在蛋白结合和细胞内游离亮氨酸中的标记丰度来确定总细胞蛋白的分数合成率(FSR)。当细胞在无谷氨酰胺培养基中生长时,蛋白质FSR(28+/-1.5%/天)和细胞内谷氨酰胺浓度(6.1+/-0.6微摩尔/克蛋白质)保持不变。相反,MSO治疗导致蛋白质合成显著减少(4.6+/-0.6 vs.20.2+/-0.8%/天,P<0.01)。MSO孵育后,补充0.5-2 mM谷氨酰胺4小时,但不添加甘氨酸或谷氨酸,蛋白质FSR恢复到控制值(24+/-1%/天)。这些结果表明,在Caco-2细胞中,1)谷氨酰胺的从头合成非常活跃,因为它可以在谷氨酰胺缺乏期间维持细胞内谷氨酰胺库,2)谷氨酰胺合成的抑制与蛋白质合成的减少有关,3)当谷氨酰胺合成受到抑制时,外源性谷氨酰胺恢复正常肠道FSR。由于将细胞系用作实验模型的固有局限性,这些发现对人体肠道的生理相关性仍有待确定。

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