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2001年6月29日;276(26):23616-23.
doi:10.1074/jbc。M10114200。 Epub 2001年4月23日。

人类DNA聚合酶γ对抗病毒脱氧核苷酸的差异掺入和去除

附属公司
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人类DNA聚合酶γ对抗病毒脱氧核苷酸的差异掺入和去除

S E Lim公司等。 生物化学杂志
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摘要

用于控制人类免疫缺陷病毒1型感染的抗病毒核苷酸类似物治疗可导致线粒体毒性。我们通过比较六种抗病毒核苷酸类似物的插入和外核溶解去除,评估了此类类似物通过人类线粒体DNA聚合酶(pol-gamma)抑制DNA合成的能力。插入2’,3’-二脱氧-TTP(ddTTP),3’-azido-TTP(AZT-TP),2’,3'-二脱羧-CTP(ddCTP),2′,3’-dedehydro-TTP(D4T-TP)、(-)-2’,3′-dedeoxy-3'-硫胞苷(3TC-TP)和碳环2’,3-二脱氧-ddGTP(CBV-TP)的表观稳态K(m)和K(cat)值表明纳入了所有六种类似物,尽管效率不同。pol-gamma在体外对二脱氧核苷酸和D4T-TP的利用与天然脱氧核苷酸一样有效,而AZT-TP、3TC-TP和CBV-TP只是DNA链延长的中度抑制剂。从DNA中高效切除双脱氧核苷酸、D4T、AZT和CBV预示着成功掺入后在体内持续存在。相比之下,3'末端3TC残留物的去除效率是天然3'末端的50%。最后,我们观察到已知存在于细胞中的AZT-单磷酸浓度对核酸外切酶活性的抑制。因此,尽管它们最大的抑制作用是通过结合和链终止实现的,但这些类似物在DNA中的持续存在和抑制外核溶解校对也可能导致线粒体毒性。

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