L-selectin can facilitate metastasis to lymph nodes in a transgenic mouse model of carcinogenesis

doi:10.1073/pnas.061633698

.2001年3月27日；98(7):3976-81.

doi:10.1073/pnas.061633698。 Epub 2001年3月13日。

在转基因小鼠致癌模型中，L-选择素可促进淋巴结转移

F钱¹, D Hanahan公司, I L魏斯曼

附属公司

PMID： 11274419
预防性维修识别码： PMC31164型
内政部： 10.1073/pnas.061633698

在转基因小鼠致癌模型中，L-选择素可促进淋巴结转移

F钱等。美国国家科学院程序. 2001.

.2001年3月27日；98(7):3976-81.

doi:10.1073/pnas.061633698。 Epub 2001年3月13日。

作者

F钱¹, D Hanahan公司, I L魏斯曼

附属

¹斯坦福医学院病理与发育生物学系，斯坦福，加利福尼亚州94305，美国。

PMID： 11274419
预防性维修识别码： PMC31164型
内政部： 10.1073/pnas.061633698

摘要

L-选择素介导淋巴细胞归巢至淋巴结（LN）。表达大鼠胰岛素启动子调控的猿猴病毒40 Tag（RIP-Tag）的转基因小鼠会发展成大的局部癌症，并转移到肝脏，但不会转移到LN。为了测试淋巴结转移的缺乏是否反映了它们没有进入循环，我们制造了转基因小鼠，在胰腺β细胞中表达Tag（T）、L-选择素（L）和大肠杆菌LacZ（Z）。LTZ小鼠出现了具有LN转移的胰岛素瘤；抗L-选择素单克隆抗体阻断了转移。转移后，来自这些淋巴结的LacZ（+）肿瘤细胞回到次级淋巴结。这些结果表明，高血管化的胰岛癌将肿瘤细胞脱落到血流中，这是发生转移的必要但不充分的条件；L-选择素可促进此类肿瘤细胞归巢到淋巴结，导致转移。

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数字

图1
胰岛素诱导L-选择素、Tag和β-gal的表达LTZ三重转基因小鼠的细胞。三种转基因的表达在7周龄小鼠的增生性胰岛中。血管生成性胰岛显示的是9周大的老鼠。胰腺冰冻切片染色首先是Ab到L-选择素(一)或标记(b条)其次是辣根过氧化物酶结合二级抗体，或用X-gal培养(*c（c）*). （放大倍率：×160。）

图2
野生型和LTZ小鼠PLN的比较。(一)安三重转基因小鼠颈部的放大PLN(中部)与来自野生型小鼠。(b条)一组扩大的印尼国家电力公司三重转基因小鼠(赖特)与野生型小鼠的正常大小LN(左侧).（放大倍率：×2）

图3
LTZ肿瘤细胞向PLN和MLN转移的频率增加老鼠。不同器官切片并用X-gal和β-gal的显微镜检测⁺细胞。共有70只LTZ小鼠、30只ZT小鼠和30只LZ小鼠检查。转移百分比表示其中的小鼠数量蓝色β-半乳糖⁺肿瘤细胞发现于指示器官除以检查的小鼠总数。

图4
在三转基因小鼠的PLN中检测到肿瘤细胞。这个从14周龄的三转基因小鼠中分离出PLN。节点切片，在X-gal中培养，并在显微镜下检查用于蓝色肿瘤细胞。这些部分取自印尼国家电力公司四只LTZ小鼠，按以下放大倍数拍照：(一) ×40, (b条) ×80, (*c（c）*)×320，以及(d日) ×320.

图5
LTZ肿瘤细胞对PLN和MLN的特异性归巢。原始文化胰岛素瘤细胞用任一DiI（对于三重转基因小鼠）或DiO（3′，3′-二十八烷氧基碳菁高氯酸盐用于缺乏L-选择素的双转基因小鼠）。安相同数量的两个标记细胞群被预先培养PBS或MEL-14（17），然后注射到野生型小鼠。静脉注射半小时后，小鼠被杀死的；收集、切片PLN、MLN和PP组织，并用荧光显微镜检查。(一)PLN来自用PBS预孵育的混合物注射小鼠。(b条)注射混合物的小鼠MLN在PBS中预培养(*c（c）*)小鼠PP注射混合物在PBS中预培养(d日)PLN来自鼠标注入预先培养Mel-14的混合物，即抗L-选择素单克隆抗体。（放大倍率：×80。）

图6
LTZ小鼠PLN中的微转移是致瘤的。收集的PLN将来自三重转基因小鼠的肉切碎，并将s.c.-注射到照射野生型小鼠腋窝区。40天后，老鼠处死并检查肿瘤生长情况。图中显示的是显示肿瘤生长的两种不同小鼠的腋窝区域。（放大倍率：×2.）

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