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.2000年12月；6(6):1389-99.
doi:10.1016/s1097-2765（00）00136-2。

促凋亡Bcl-2家族成员bak和bax的联合功能对多种组织的正常发育至关重要

T林德斯滕 1, A J罗斯, 国王, W X宗, J C Rathmell公司, H A席尔斯, E乌尔里奇, K G Waymire公司, P马哈尔, K弗劳沃思, Y Chen先生, M Wei先生, V M工程, D M阿德尔曼, M C西蒙, 阿玛, J A金, G埃文, S J Korsmeyer公司, G R麦格雷戈, C B汤普森
附属公司

促凋亡Bcl-2家族成员bak和bax的联合功能对多种组织的正常发育至关重要

T林德斯滕等。 分子电池. 2000年12月.

摘要

促凋亡Bcl-2家族成员被认为在调节细胞凋亡中起着核心作用。然而，缺乏bax的小鼠表现出有限的表型异常。如图所示，bak（-/-）小鼠被发现发育正常，生殖能力良好，没有出现任何与年龄相关的疾病。然而，当Bak缺乏小鼠与Bax缺乏小鼠交配以产生缺乏这两种基因的小鼠时，大多数Bax（-/-）Bak（-/--）动物围产期死亡，只有不到10%的动物存活到成年。bax（-/-）bak（-/&）小鼠表现出多种发育缺陷，包括趾间网持续存在，阴道管闭锁，中枢神经和造血系统内多余细胞积聚。因此，Bax和Bak在哺乳动物发育和组织稳态期间的凋亡调节中具有重叠作用。

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数字

图1
图1。的生成烘烤–/–老鼠
（A） 基因组组织烘烤给出了基因、靶向策略和最终的靶向结构。所示的限制性内切酶位点为（Xb）、XbaI；（Bg），BglII；（S） ，SalI公司；和（Xh），XhoI。（B） 小鼠脾脏和胸腺全细胞裂解物的Western blot分析烘烤+/+,烘烤+/–、和烘烤–/–老鼠。
图2
图2。的大体解剖表型bax（巴克斯）–/–烘烤–/–老鼠
（A） 的照片bax（巴克斯）+/+烘烤+/–（a和e），bax（巴克斯）+/+烘烤–/–（b和f），bax（巴克斯）–/–烘烤+/+（c和g），以及bax（巴克斯）–/–烘烤–/–（d和h）小鼠。（B） 爪子的背视图和腹视图bax（巴克斯）+/–烘烤–/–（a和c）和bax（巴克斯）–/–烘烤–/–（b和d）。（C） 阴道开口照片bax（巴克斯）+/–烘烤–/–和bax（巴克斯）–/–烘烤–/–老鼠。箭头指向阴道外部区域。
图3
图3。脑内小神经细胞在脑室周围的积聚bax（巴克斯）–/–巴克–/–老鼠
（A） 脑组织的组织切片bax（巴克斯）+/+烘烤+/–（a） ，bax（巴克斯）–/–烘烤+/+（b） ，bax（巴克斯）+/–烘烤–/–（c） 、和bax（巴克斯）–/–烘烤–/–（d） 小鼠25倍放大。每组位于大致相同的水平，包括前基底神经节和胼胝体。箭头指向所有截面的心室周围区域。（B） 中脑背中线的组织切片bax（巴克斯）–/–烘烤–/–小鼠400倍放大，用抗CD45RB染色。箭头指向CD45+细胞。箭头指向小神经元细胞的异常聚集。
图4
图4。脾肿大、淋巴结病和外周器官的淋巴浸润bax（巴克斯）–/–烘烤–/–老鼠
（A） 脾脏和淋巴结的照片bax（巴克斯）–/–烘烤–/–和对照小鼠。（B） 脾组织切片（a和B）2倍放大，肝脏组织切片（c和d）10倍放大，肾脏组织切片（e和f）10倍倍放大bax（巴克斯）+/+烘烤+/–（a、c和e）和bax（巴克斯）–/–烘烤–/–（b、d和f）小鼠。
图5
图5。外周血淋巴细胞聚集bax（巴克斯）–/–烘烤–/–用流式细胞术分析小鼠记忆细胞丰富和因忽视而死亡的淋巴结细胞外周血淋巴细胞
（A和B）CD4和CD8表达（A）和Thy1.2和B220表达（B）。还分析了门控T细胞CD44和CD62L的表达。还分析了门控B细胞IgD的表达。（C） 脾脏外周血淋巴细胞bax（巴克斯）–/–巴克–/–（开放符号）和对照小鼠（封闭符号）培养4天。细胞用PI染色，并在指定时间进行FACS分析。样品分析一式三份。
图6
图6。胸腺细胞死亡检测bax（巴克斯）–/–烘烤–/–老鼠
（A） 胸腺细胞来自bax（巴克斯）–/–烘烤–/–小鼠和对照小鼠接受500radγ射线照射（封闭栅）或不治疗（开放栅）。细胞在培养24小时后用PI染色并进行FACS分析。给出了每只小鼠的三份样品的平均值和标准偏差。（B） 胸腺细胞与指定量的足叶乙甙一起培养。细胞在培养24小时后用PI染色并进行FACS分析。给出了三份样品的平均值和标准偏差。（C） 胸腺细胞与指定量的抗Fas抗体一起培养。细胞在培养24小时后用PI染色并进行FACS分析。给出了三份样品的平均值和标准偏差。
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