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.2000年9月27日;1487(2-3):246-54.
doi:10.1016/s1388-1981(00)00099-8。

蛋白激酶calpha的C2结构域直接参与C1结构域与膜的二酰甘油依赖性结合

附属公司

蛋白激酶calpha的C2结构域直接参与C1结构域与膜的二酰甘油依赖性结合

P Conesa-Zamora公司等。 Biochim生物物理学报. .

摘要

众所周知,蛋白激酶Calpha(PKCalpha)对许多细胞过程的控制至关重要,为了测试几个氨基酸残基的功能性,将其进行定点突变。因此,D187、D246和D248均位于C2结构域的Ca(2+)结合位点,被N取代。亚细胞分离实验表明,这些突变对钙依赖性和二酰甘油依赖性膜结合都很重要。突变体不能磷酸化典型的PKC底物,如组蛋白和髓鞘碱性蛋白。此外,通过增加二甘醇的浓度,其中一个突变体(D246/248N)能够恢复总活性,尽管其所需的二甘醇量大于野生型蛋白质所需的量。另一方面,其他突变体(D187N和D187/246/248)仅恢复了50%的活性。这些数据表明,二醇甘油结合的C1结构域和C2结构域之间存在关系,这种关系对酶的激活非常重要。这些发现使我们提出了PKCalpha激活的机制,其中C1和C2域不能被视为独立的膜结合模块。

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