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.2000年2月;39(1):38-46.
doi:10.1007/s003940050074。

谷氨酰胺对Caco-2细胞从头合成嘌呤核苷酸的作用

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谷氨酰胺对Caco-2细胞从头合成嘌呤核苷酸的作用

J J博扎等。 欧洲坚果杂志. 2000年2月.

摘要

背景:人体的核苷酸库来自三个潜在来源:从头合成、预先形成的核苷酸/碱基的回收或饮食。体内对这些同化途径的相对贡献知之甚少。膳食核苷酸被认为对胃肠道的发育和修复具有有益的作用。在核酸合成需要大量核苷酸的情况下,快速转换的组织,如肠道和免疫系统细胞,可能会利用预先形成的核苷酸(来自饮食)。因此,核苷酸可以被认为是条件必需营养素。

工作目标和方法:开发一种测量Caco-2细胞中RNA-尿苷核苷酸从头合成的方法,该方法依赖于将14C-甘氨酸并入核苷酸的嘌呤环。建立在含有不同浓度谷氨酰胺的培养基中生长的Caco-2细胞在添加或不添加核苷酸的情况下RNA嘌呤核苷酸的部分合成速率。使用未分化的Caco-2细胞,通过向培养基中添加IL-1β,研究组织核糖核苷从培养基或在不同浓度谷氨酰胺存在下从头合成的程度。

结果和结论:培养基中高水平谷氨酰胺的存在对细胞增殖至关重要(通过测量嘌呤核苷酸的部分合成速率估计),核苷酸的存在不能取代Caco-2细胞增殖的谷氨酰胺依赖性。外源性嘌呤核苷酸在Caco-2细胞RNA中的结合非常有限,当细胞受到谷氨酰胺剥夺的应激时,这一点变得非常重要。添加白细胞介素-1β的应激导致新合成的RNA-尿核苷酸的维持或增加,即使存在外源核苷酸。然而,当培养基中存在浓度为0.5 mmol/L的谷氨酰胺时,向培养基中添加白细胞介素-1β可提高预先形成的嘧啶核苷酸的回收率,用于核酸合成。

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