跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2000年8月；74(15):6821-31.
doi:10.1128/jvi.74.15.6821-6831.2000。

表达麻疹病毒血凝素蛋白的人副流感病毒3型（PIV3）为婴儿早期免疫麻疹病毒和PIV3提供了一种潜在的方法

A P杜宾 1, M H Skiadopoulos先生, J M麦考利夫, J M索具, S R苏尔曼, P L柯林斯, B R墨菲
附属公司

表达麻疹病毒血凝素蛋白的人类副流感病毒3型（PIV3）为婴儿早期免疫麻疹病毒和PIV3提供了一种潜在的方法

A P杜宾等。 J维罗尔. 2000年8月.

摘要

使用重组人副流感病毒3型（PIV3）作为载体表达麻疹病毒的主要保护性抗原血凝素（HA）糖蛋白，以产生可鼻内给药的二价PIV3麻疹病毒。将麻疹病毒HA开放阅读框（ORF）作为附加转录单位插入野生型PIV3的N-P、P-M或HA-神经氨酸酶（HN）-L基因连接处或PIV3减毒衍生物的N-P或P-M基因连接处，称为rcp45L。携带HA插入物的重组PIV3（rPIV3）病毒在体外的复制速度比其亲本病毒慢，但达到了可比的最高滴度，即每毫升>/=10（7.5）50%的组织培养感染剂量嵌合病毒在仓鼠上呼吸道的复制能力比其各自的亲本病毒低5到10倍。因此，插入大约2-kb的ORF本身就产生了衰减，这种衰减与cp45L突变产生的衰减相加。减毒的cp45L PIV3（HA）重组体在仓鼠中诱导了对PIV3攻击病毒复制的高度抵抗，并诱导了非常高水平的麻疹病毒中和抗体（>1:8000），远远超过了已知的人类保护性抗体水平。在N-P或P-M连接处表达HA基因的rPIV3诱导的麻疹病毒中和抗体比在HN-L连接处携带HA基因的r PIV3多400倍，表明N-P或P-M连接处似乎是首选的插入位点。先前的研究表明，PIV3 cp45病毒是rcp45L的一种更弱版本，在猴子的呼吸道中有效复制，即使在存在非常高滴度的被动转移的PIV3抗体的情况下给药，也具有免疫原性和保护性（a.P.Durbin、C.J.Cho、W.R.Elkins、L.S.Wyatt、B。Moss和B.R.Murphy，J.Infect。数字化信息系统。179:1345-1351, 1999). 这表明，这种经鼻注射的PIV3（HA）嵌合病毒可用于用母体获得的麻疹病毒抗体免疫婴儿，而目前的经鼻注射麻疹病毒活疫苗对这些婴儿无效。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
将麻疹病毒HA ORF插入重组PIV3基因组。（A） 包含麻疹病毒HA基因完整ORF的2028-nt插入物的示意图（不按比例）。插件按5′至3′的顺序包含以下内容：斯图I站点；PIV3抗原组的nt 8602至8620，由HN基因及其基因末端信号的下游非编码序列组成；保守的PIV3基因间（IG）三核苷酸；来自PIV3抗原组的nt 6733至6805，其中包含HN基因起始和上游非编码区；麻疹病毒HA ORF；PIV3 nt 8525至8597，是HN基因的下游非编码序列；还有一秒钟斯图我的网站。该结构设计用于在插入后再生含有斯图我定位并将麻疹病毒ORF直接放置在PIV3 HN基因的转录信号和非编码区的两侧。PIV3野生型JS（rJS）的完整抗原组斯图中间图显示了HN基因3′非编码区nt8600的I位点。下图是表达麻疹HA蛋白的PIV3抗原组插入斯图我的网站。用于该插入的HA cDNA来自cDNA克隆，该cDNA克隆与野生型Edmonston HA蛋白具有两个氨基酸差异，用星号表示。（B） 含有麻疹病毒HA基因的完整ORF的1926 nt插入物的图（非按比例），其序列被证实与埃德蒙斯顿野生型菌株的序列相同。插件按5′到3′的顺序包含以下内容：Afl公司II站点；来自PIV3抗原组的nt 3699至3731，其中包含P-M基因连接，包括P基因的下游非编码序列、其基因结束信号、基因间区域和M基因开始信号；另外三种非病毒核苷酸（GCG）；完整的HA ORF；来自P基因下游非编码区的PIV3 nt 3594至3623；还有一秒钟Afl公司II站点。图1显示了PIV3的野生型JS菌株的完整抗原组Afl公司麻疹HA ORF插入前（顶部）和插入后（底部）N基因3′非编码区的II位点。面板2说明了PIV3野生型JS菌株的抗原组Afl公司麻疹HA ORF插入前（顶部）和插入后（底部）P基因3′非编码区的II位点。中的版本内容提供商45L主干仅在L蛋白中942、992和1558位的氨基酸替换以及伴随的沉默限制性内切酶标记（52、53）上有所不同。
图2
图2
麻疹病毒HA蛋白在LLC-MK2细胞中的表达。细胞感染r内容提供商45升（HA P-M），r内容提供商45L（HA N-P），Edmonston麻疹病毒野生型株，野生型rJS PIV3。贴标签后使用[35S] 蛋氨酸、裂解物由三种PIV3 HN蛋白特异性单克隆抗体的混合物制备并免疫沉淀。与HN蛋白相对应的64-kDa带（开放箭头）存在于三种PIV3感染的细胞裂解物（3、5和7道）中，但不存在于麻疹病毒感染的细胞溶解物（9道）中。Lanes b，与麻疹病毒HA蛋白（闭合箭头）对应的76-kDa带，是从感染r内容提供商45（HA）嵌合病毒（第6和第8道）和麻疹病毒（第10道），但不在rJS感染细胞（第4道）的裂解物中。
图3
图3
与亲本病毒rJS相比，rPIV3（HA N-P）、rPIV4（HA P-M）或rPIV5（HA HN-L）的多周期复制。病毒滴度显示为对数10TCID公司50每毫升，是六个样本的平均值。本试验的检测下限为50 TCID50/毫升。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • 负链RNA病毒载体疫苗。
    Murr M，Mettenleiter T。 Murr M等人。 方法分子生物学。2024;2786:51-87. doi:10.1007/978-1-0716-3770-8_3。 方法分子生物学。2024 PMID：38814390 审查。
  • 病毒载体疫苗：在人类疾病中的设计、开发、预防和治疗应用。
    王S、梁B、王伟、李莉、冯N、赵Y、王T、闫F、杨S、夏X。 王S等。 信号传输目标热。2023年4月7日；8(1):149. doi:10.1038/s41392-023-01408-5。 信号传输目标热。2023 PMID：37029123 免费PMC文章。 审查。
  • 埃博拉病毒疾病疫苗：发展、现状和挑战。
    Malik S、Kishore S、Nag S、Dhasmana A、Preetam S、Mitra O、León-Figueroa DA、Mohanty A、Chattu VK、Assefi M、Padhi BK、Sah R。 Malik S等人。 疫苗（巴塞尔）。2023年1月26日；11(2):268. doi:10.3390/疫苗11020268。 疫苗（巴塞尔）。2023 PMID：36851146 免费PMC文章。 审查。
  • 埃博拉：疫苗开发的经验教训。
    费尔德曼H、费尔德曼F、马尔齐A。 Feldmann H等人。 微生物年鉴。2018年9月8日；72:423-446. doi:10.1146/annurev-micro-090817-062414。 微生物年鉴。2018 PMID：30200851 免费PMC文章。 审查。
  • 多价和多病原体病毒载体疫苗。
    Lauer KB、Borrow R、Blanchard TJ。 Lauer KB等人。 临床疫苗免疫学。2017年1月5日；24（1）：e00298-16。doi:10.1128/CVI.00298-16。打印2017年1月。 临床疫苗免疫学。2017 PMID：27535837 免费PMC文章。 审查。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Albrecht P，Ennis F A，Saltzman E J，Krugman S.婴儿母亲抗体持续超过12个月：麻疹疫苗失效的机制。儿科杂志。1977;91:715–718.-公共医学
    1. Black F L，Sheridan S R.麻疹减毒疫苗的研究。四、 通过几种途径接种疫苗。《新英格兰医学杂志》，1960年；263:165–169.-公共医学
    1. Blanchard T J、Alcami A、Andrea P、Smith G L。改良的安卡拉痘苗病毒在人类细胞中复制有限，并且缺乏几种免疫调节蛋白：作为人类疫苗的意义。维罗尔将军。1998;79:1159–1167.-公共医学
    1. Carroll M W，Moss B.高度减毒的痘苗病毒MVA株的宿主范围和细胞致病性：重组病毒在非人哺乳动物细胞系中的繁殖和产生。病毒学。1997;238:198–211.-公共医学
    1. 疾病控制和预防中心。消灭麻疹：世界卫生组织、泛美卫生组织和疾病预防控制中心共同主办的一次会议的建议。病态死亡周刊1997；46:1–21.-公共医学

MeSH术语