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.2000年6月15日;10(12):743-6.
doi:10.1016/s0960-9822(00)00541-8。

富含肌动蛋白结构中磷脂酰肌醇4,5-二磷酸的动力学

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富含肌动蛋白结构中磷脂酰肌醇4,5-二磷酸的动力学

E G高等。 当前生物. .
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摘要

已知磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PI(4,5)P(2))可调节从离子通道到肌动蛋白聚合的广泛分子靶点和细胞过程[1][2][3][4][5][6]。最近的研究使用磷脂酶C-δ1(PLC-delta1)与绿色荧光蛋白(GFP)融合的立体结构域作为体内PI(4,5)P(2)的检测器[7][8][9][10]。尽管这些研究表明PI(4,5)P(2)集中在质膜中,但其与肌动蛋白结构的关系尚未见报道。在本研究中,表达与增强型绿色荧光蛋白(PH-EGFP)相关的PLC-delta1 PH结构域的NIH-3T3活成纤维细胞的荧光成像显示,细胞外围不同结构中的荧光强烈且不均匀。随着时间的推移,相应的荧光和相控成像显示,这些荧光结构与动态的相感特征相关,这些相感特征被识别为皱褶和细胞背表面的微空洞样突起。固定细胞和渗透细胞的成像显示,PH-EGFP与F-actin在皱褶中共同定位,而与vinculin在局灶性粘连中没有共同定位。PH-EGFP融合蛋白在富含F-actin的质膜高度动态区域的选择性浓度支持了这样的假设,即PI(4,5)P(2)的局部合成和横向分离在空间上限制了actin聚合,从而影响细胞的扩散和收缩。

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