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.2000年4月;43(4):775-90.
doi:10.1002/1529-0131(200004)43:4<775::AID-ANR8>3.0.CO;2-7.

类风湿关节炎患者活化单核细胞中已知和新基因的鉴定

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类风湿关节炎患者活化单核细胞中已知和新基因的鉴定

B Stuhlmüller先生等。 大黄性关节炎. 2000年4月.
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摘要

目标:确定类风湿关节炎(RA)患者单核细胞(MO)的基因激活模式。

方法:从一例活动性RA患者的第一次白细胞分离MO中构建互补DNA(cDNA)文库;用来自第一次白细胞分离MO(激活池)和第三次白细胞培养MO(非激活池)的32P标记cDNA作为探针进行差异杂交。使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)评估另外26名RA患者和6名正常对照者MO中的基因激活。

结果:从第一次和第三次真核分裂MO中减去基因,得到482个差异表达克隆。在第一次白细胞置换术MO中,这些克隆包括以下内容:1)白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α、生长相关癌基因α(GROalpha)/黑色素瘤生长刺激活性、巨噬细胞炎性蛋白2/GRObeta、铁蛋白、α1-抗胰蛋白酶、溶菌酶、转氨酶、,Epstein-Barr病毒编码RNA 1(EBER-1)/EBER-2相关蛋白、血小板反应蛋白1、血管紧张素受体II(ATRII)C末端同源物和RNA聚合酶II延伸因子(elongin);2) 两个与功能未定义基因同源的克隆(BSK-67和BSK-83);和3)三个未知的cDNA序列(BSK-66、80、89)。在第三次真核细胞移植MO中,克隆包括分化基因(HOX-B3、胸腺肽-beta4、PU.1、葡萄糖脑苷酶、MEL-18和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)和3个未知/功能未定义的序列。来自活化池的大多数基因在另外2名RA患者的白细胞分离样本中的差异表达得到了证实。在RA患者的MO中,不仅IL-1β和ATRII同源物显著过表达(最大36倍),而且4个未知/功能不明确的基因(最大102倍)也显著过表达。值得注意的是,BSK-89信使RNA水平与血沉呈正相关,而BSK-83信使RNA与血沉和C反应蛋白水平呈负相关。

结论:基因减影和半定量RT-PCR的联合策略可以定义不同疾病阶段(包括治疗诱导缓解)的MO激活模式,并识别与RA致病相关的新MO基因。

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