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.2000年3月;32(3):465-72.
doi:10.1016/s0168-8278(00)80398-0。

应激激活蛋白激酶在培养大鼠肝星状细胞激活中的作用

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应激激活蛋白激酶在培养大鼠肝星状细胞激活中的作用

H L李维斯等。 肝脏病学杂志. 2000年3月.

摘要

背景/目的:与肝星状细胞(HSC)激活有关的信号级联在很大程度上尚不清楚。启动激活的因素包括肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β、内皮素和氧化应激。据报道,在其他细胞类型中,其中一些可刺激p38有丝分裂原活化蛋白(MAP)激酶和c-Jun N末端激酶(JNK)。因此,我们研究了这些激酶在HSC激活中的作用。

方法:HSC是从雄性Wistar大鼠中分离出来的。在HSC第2天进行静态实验,在HSC传代第15天进行转化实验。激酶活性通过特异底物蛋白的免疫沉淀和磷酸化以及免疫印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达来确定。

结果:p38 MAP激酶的组成活性在转化细胞中高于静止细胞。在静止细胞中,TNFalpha分别刺激p38MAP激酶和JNK活性12倍和4倍,这被间接抗氧化剂2-巯基乙醇减半。内皮素-1通过内皮素-B受体激活静止细胞中的两种激酶,而TGF-β没有作用。2-巯基乙醇和p38抑制剂(SB202190)均抑制第5天细胞的α-SMA表达。

结论:TNFalpha和内皮素对p38MAP激酶和JNK的激活,以及2-巯基乙醇对这种激活的抑制,提供了间接证据支持它们在HSC转化中的作用。p38 MAP激酶作用的直接证据是,其组成活性在转化细胞中高于静止细胞,并且其抑制剂通过α-SMA表达评估降低了培养中HSC的激活。

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