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.2000年2月11日;275(6):4049-54.
doi:10.1074/jbc.275.6.4049。

神经元谷氨酰胺转运体的克隆及功能鉴定

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神经元谷氨酰胺转运体的克隆及功能鉴定

H瓦洛奎等。 生物化学杂志. .
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摘要

谷氨酰胺是谷氨酸神经递质库的首选前体,谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中的主要兴奋性递质。我们从培养的谷氨酸能神经元中分离出一个编码质膜谷氨酰胺转运体的互补DNA克隆(命名为GlnT),并使用成纤维细胞中的T7痘苗系统对其特性进行了检测。当GlnT转染CV-1细胞时,L-谷氨酰胺是首选底物。转运依赖Na(+),并被中性氨基酸转运系统a的特异抑制剂α-甲氨基异丁酸抑制。GlnT摄取谷氨酰胺的动力学分析是饱和的,在pH 7.4时,米氏常数(K(m))为489+/-88μm。GlnT介导的谷氨酰胺摄取对pH敏感,在pH 8.2时的摄取效率是在pH 6.6时的5倍。只有最大运输速度增加,K(m)没有显著变化。GlnT mRNA和蛋白在中枢神经系统中分布广泛,在以谷氨酸为神经递质的神经元上表达。在培养的小脑颗粒细胞中,GlnT仅在神经元上表达,在星形胶质细胞中不表达。GlnT的表达随着这些细胞在体外的形态和功能分化而增加,这与其为谷氨酸能神经元提供神经递质前体的作用一致。GlnT是A系统中性氨基酸转运蛋白家族的第一个成员,具有11个假定的跨膜结构域,是调节突触前谷氨酸能功能的潜在靶点。

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