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.1999年12月31日;274(53):37736-42.
doi:10.1074/jbc.274.53.37736。

幽门螺杆菌空泡毒素(VacA)显性阴性突变抑制VacA诱导的细胞空泡化

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幽门螺杆菌空泡毒素(VacA)显性阴性突变抑制VacA诱导的细胞空泡化

A D乙烯-双等人。 生物化学杂志. .
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摘要

大多数幽门螺杆菌菌株分泌毒素(VacA),导致上皮细胞的结构和功能改变,并被认为在幽门螺杆杆菌相关胃十二指肠疾病的发病机制中发挥重要作用。VacA的氨基酸序列、超微结构形态和细胞效应与任何其他已知的细菌蛋白毒素无关,VacA作用机制尚不清楚。为了分析VacA氨基末端附近一个独特的强疏水性区域的功能作用,我们构建了一株产生VacA突变蛋白(VacA-(Delta6-27))的幽门螺杆菌菌株,该蛋白中的疏水片段被删除。VacA-(Delta6-27)由幽门螺杆菌分泌,适当寡聚,形成二维脂质结合晶体,其结构特征与野生型VacA无明显区别。然而,VacA-(Delta6-27)在平面脂质双层中形成离子传导通道的速度明显慢于野生型VacA,并且突变通道的阴离子选择性较低。野生型VacA和VacA-(Delta6-27)的混合物形成了膜通道,其性质介于任一孤立物种形成的膜通道之间。VacA-(Delta6-27)在HeLa细胞的结合或摄取方面没有任何可检测的缺陷,但这种突变毒素未能诱导细胞空泡化。此外,当纯化的VacA-(Delta6-27)和纯化的野生型VacA的等摩尔混合物同时添加到HeLa细胞中时,突变毒素表现出显性负效应,完全抑制野生型Vac a的空泡化活性。当HeLa细胞与编码野生型和突变毒素的质粒共转染时,也观察到显性负效应。我们提出了一个模型,其中VacA-(Delta6-27)的显性负效应是由于突变型和野生型VacA蛋白之间的蛋白-蛋白质相互作用造成的,从而导致形成具有缺陷功能活性的混合低聚物。

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引用人

  • 没有不可逾越的障碍:幽门螺杆菌从细菌细胞质到真核细胞器的VacA毒素。
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