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.1999年11月:80(第11部分):2987-2995。
doi:10.1099/0022-1317-80-11-2987。

利用cDNA构建重组造晶状体新城疫病毒

附属公司

从cDNA中产生重组肠源性新城疫病毒

安吉拉·罗默·奥伯德(Angela Römer-Oberdörfer)等。 J Gen Virol公司. 1999年11月.

摘要

从转染到稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞中的质粒同时表达抗原敏感的NDV RNA和NDV核蛋白、磷酸蛋白和RNA-依赖性RNA聚合物后,可重复生成疫苗株Clone-30的重组lentogenic Newcastle disease virus(NDV)。为此,克隆30的基因组包含15186 nt,在T7 RNA聚合酶启动子控制下,在组装成全长cDNA克隆之前进行克隆和测序。将转染上清液接种到SPF鸡胚尿囊腔中,扩增出重组病毒。子代病毒中存在两个标记限制位点,共包含五个人工引入非编码区的核苷酸变化。重组NDV在细胞培养和胚胎卵中的生长特性与亲本野生型病毒无明显区别。此外,通过对日龄SPF鸡进行脑内接种,两种病毒的脑内致病性指数均为0.29,证明重组NDV是NDV亲本疫苗株的忠实复制品。

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