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.1999年11月;73(5):2184-94.

星形胶质细胞ASCT2氨基酸转运体作为谷氨酰胺外排的介质

附属公司
  • PMID: 10537079
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星形胶质细胞ASCT2氨基酸转运体作为谷氨酰胺外排的介质

布勒等。 神经化学杂志. 1999年11月.
免费文章

摘要

星形胶质细胞释放的谷氨酰胺是大脑中谷氨酸-谷氨酰胺循环的重要组成部分。培养的大鼠星形胶质细胞吸收谷氨酰胺的途径至少有四种。与早期研究一致,检测到氨基酸转运系统ASC、a、L和N的重要贡献。目前还没有确定这些系统是否也参与谷氨酰胺外排,或者是否存在特异性外排转运体。我们在这里表明,ASCT2是运输系统ASC的一种变体,在富含星形胶质细胞的大鼠原代培养物中强烈表达,但在富含神经元的原代培养液中不表达。大鼠星形胶质细胞ASCT2的氨基酸序列与小鼠ASCT2相同,为83%。在表达大鼠ASCT2的非洲爪蟾卵母细胞中,我们观察到[U-14C]谷氨酰胺(Km=70 microM)的高亲和力摄取,这是Na(+)依赖性、集中性的,并且不受膜去极化的影响。当卵母细胞预加载[U-14C]谷氨酰胺时,在缺乏细胞外氨基酸的情况下未检测到谷氨酰胺流出。无论是降低细胞内pH值还是升高温度都不会引起流出。然而,向细胞外溶液中添加0.1 mM未标记的丙氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺或亮氨酸,会导致表达ASCT2的卵母细胞快速释放谷氨酰胺。ASCT2未识别为底物的氨基酸在这一作用中无效。细胞外谷氨酸在pH 7.5时刺激谷氨酰胺释放较弱,但在将pH降至5.5时更有效,这与ASCT2对谷氨酸亲和力的pH依赖性一致。我们的研究结果表明,ASCT2通过与细胞外氨基酸的强制性交换,在星形胶质细胞的谷氨酰胺流出中发挥着重要作用。然而,该途径对体内或体外细胞释放谷氨酰胺的相对贡献尚待确定。

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