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1999年6月;6(6):973-85.
doi:10.1038/sj.gt.3300938。

使用新方法纯化重组腺相关病毒可提高感染滴度和产量

附属公司

使用新方法纯化重组腺相关病毒可提高感染滴度和产量

S Zolotukhin公司等。 基因疗法 1999年6月

摘要

基于氯化铯超速离心的rAAV纯化的传统方法通常产生质量可变的载体制剂,并导致粒子感染性的显著损失。我们在此报告了几种新的纯化策略,包括使用非离子型碘xanol梯度,然后通过常规柱或HPLC柱进行离子交换或肝素亲和层析。这些方法使rAAV从粗裂解液中回收率超过50%,并常规生成纯度超过99%的载体。更重要的是,新的纯化程序持续生产rAAV库存,其颗粒感染率低于100,这明显优于传统方法。新方案将感染性rAAV的总产量提高了至少10倍,并允许在1个工作日内完全纯化rAAV。这些方法中的一些也应适用于大规模生产。

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