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.1999年4月;276(4):G965-74。
doi:10.1152/ajpgi.1999.276.4.G965。

乙醇对肠上皮紧密连接屏障的调节

附属公司

乙醇对肠上皮紧密连接屏障的调节

T Y Ma公司等。 美国生理学杂志. 1999年4月.

摘要

先前的研究表明,高浓度乙醇(>/=40%)通过对上皮细胞的直接细胞毒性作用,导致胃肠道上皮屏障的功能损伤。较低非细胞毒性剂量的乙醇对上皮屏障功能的影响尚不清楚。胃肠道上皮细胞的一个主要功能是为胃肠道腔内的有害物质提供屏障。位于顶端外侧的紧密连接(TJ)在相邻细胞的侧膜之间形成细胞旁的密封,并起到细胞旁屏障的作用。在本研究中,我们使用过滤生长的Caco-2肠上皮单层研究了低剂量乙醇对肠上皮TJ屏障功能的影响。通过测量滤过生长单层的上皮阻力或细胞旁通透性来评估Caco-2 TJ屏障功能。乙醇(0、1、2.5、5、7.5和10%)使Caco-2上皮抵抗力下降,细胞旁通透性增加,且与剂量相关。乙醇也会逐渐破坏TJ蛋白(ZO-1),使ZO-1蛋白从细胞连接处分离,并在相邻细胞之间形成大间隙。乙醇在使用剂量(</=10%)时,不会对Caco-2细胞产生细胞毒性(乳酸脱氢酶释放)。乙醇使周结合区的肌动蛋白和肌球蛋白丝解体和移位。去除乙醇后,肌动蛋白和肌球蛋白丝在细胞边界迅速重组。乙醇刺激Caco-2肌球蛋白轻链激酶(MLCK)活性,但不影响MLCK蛋白水平。特异性MLCK抑制剂ML-7抑制乙醇对MLCK活性和TJ通透性的增加,而不影响MLCK蛋白水平。与这些发现一致,代谢抑制剂叠氮化钠和2,4-二硝基苯酚显著阻止了乙醇诱导的Caco-2 TJ通透性增加,而环己酰亚胺或放线菌素D没有影响。这项研究的结果表明,低非细胞毒性剂量的乙醇通过激活MLCK,导致Caco-2肠上皮TJ屏障的功能和结构打开。

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