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.1998年1月5日;1368(1):7-18.
doi:10.1016/s0005-2736(97)00175-2。

孔蛋白、己糖激酶、线粒体肌酸激酶和腺苷酸转运体之间的复合物显示出通透性转换孔的特性。激酶调节通透性转换的意义

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孔蛋白、己糖激酶、线粒体肌酸激酶和腺苷酸转运蛋白之间的复合物显示出通透性转换孔的特性。激酶调节通透性转换的意义

G贝特纳等。 Biochim生物物理学报. .
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摘要

最近发现己糖激酶、外膜孔蛋白和腺苷酸转运体(ANT)之间的复合物可以在重建系统中建立线粒体通透性转换孔的特性。用0.5%Triton X-100从大鼠脑膜中提取复合物,并用阴离子交换色谱法分离。分子量约为400kDa,表明己糖激酶四聚体(单体100kDa)。用同样的方法分离并在脂质体中重建孔蛋白、肌酸激酶八聚体、ANT复合物。含有重组复合物的囊泡都保留了ATP,可被任一激酶用于磷酸化外部肌酸或葡萄糖。苍术苷抑制了这种活性,表明ANT参与了这一过程,并进行了功能重组。除己糖激酶复合物外,含有脂质体的内苹果酸或ATP通过添加Ca2+以N-甲基缬氨酸-4-环孢霉素敏感的方式释放,表明己糖激酶-孔蛋白-ANT复合物可能包括通透性转换孔(PTP)。类PTP结构的钙依赖性开放被ADP(表观I(50),8μM)和ATP(表观I50,84μM)抑制。葡萄糖也抑制PTP样活性,而葡萄糖-6-磷酸则消除了这种作用。尽管孔蛋白和ANT在含有肌酸激酶八聚体复合物的囊泡中具有功能活性,但Ca2+并未诱导内部底物的释放。然而,在肌酸激酶八聚体解离后,复合物表现出PTP样性质,囊泡在添加Ca2+后释放出内部代谢物。后一个过程也被N-甲基缬氨酸-4-环孢霉素抑制。在复合分离过程中,遵循肽基-脯氨酸顺式-反式-异构酶(代表亲环素)的活性。Cyp D与己糖激酶复合物共纯化,而在肌酸激酶复合物中不存在。N-甲基缬氨酸-4-环孢霉素对肌酸激酶复合物的抑制作用可以通过与似乎支持八聚体形成的肌酸激酶二聚体直接相互作用来解释。

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