Reconstitution of trimethylamine-dependent coenzyme M methylation with the trimethylamine corrinoid protein and the isozymes of methyltransferase II from Methanosarcina barkeri

doi:10.1128/jb.179.3.846-852.1997

.1997年2月；179(3):846-52.

doi:10.1128/jb.179.3.846-852.1997。

三甲胺依赖性辅酶M甲基化与巴氏甲烷八叠球菌的三甲胺corrinoid蛋白和甲基转移酶II同工酶的重组

小D J Ferguson¹, J A Krzycki公司

附属公司

PMID： 9006042
预防性维修识别码：项目经理178769
内政部： 10.1128/jb.179.3.846-852.1997年

三甲胺依赖性辅酶M甲基化与巴氏甲烷八叠球菌的三甲胺corrinoid蛋白和甲基转移酶II同工酶的重组

小D J Ferguson等。 J细菌. 1997年2月.

.1997年2月；179(3):846-52.

doi:10.1128/jb.179.3.846-852.1997。

作者

小D J Ferguson¹, J A Krzycki公司

附属

¹俄亥俄州立大学微生物系，美国哥伦布43210。

PMID： 9006042
预防性维修识别码：项目经理178769
内政部： 10.1128/jb.179.3.846-852.1997年

摘要

用三种纯化多肽实现了三甲胺依赖性辅酶M（CoM）甲基化的重组。通过刺激细胞提取物中的TMA:CoM甲基转移反应检测到其中两种多肽共纯化为三甲胺甲基转移（TMA-MT）活性。纯化的TMA-MT组分刺激了甲基-CoM形成速度七倍，高达1.7微摩尔/分钟/毫克TMA-MT蛋白。TMA-MT多肽的分子量分别为52和26 kDa。TMA-MT部分的凝胶渗透表明，52-kDa多肽以280kDa的表观分子量洗脱。26-kDa蛋白质主要以单体形式洗脱，但一些26-kDa多肽也以280-kDa峰洗脱，表明这两种蛋白质弱结合。在十二烷基硫酸钠存在下，使用凝胶渗透可以完全分离这两种多肽。corrinoid以1.1 corrin/26-kDa多肽的摩尔比与26-kDa肽保持结合。因此，这种多肽被命名为TMA类corrinoid蛋白或TCP。当TMA-MT多肽添加纯化的甲基类胡萝卜素：CoM甲基转移酶（MT2）时，可以影响TMA的去甲基化，随后CoM的甲基化，以及在高达600 nmol/min/mg的TMA-MT蛋白比活性下生成二甲胺。二甲胺和一甲胺都不是底物，活性需要柠檬酸钛和甲基紫精。TMA-MT可以与MT2的任一同工酶相互作用，但与A同工酶的亲和力最大。这些结果表明，TCP独特地参与了TMA依赖的产甲烷反应，该类corrinoid蛋白被底物甲基化，被MT2的任一同工酶去甲基化，并且在TMA生长的细胞中发现的MT2的主要同工酶是TMA:CoM甲基转移反应的有利参与者。

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