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.1994年8月11日;22(15):2990-7.
doi:10.1093/nar/22.15.290。

甲基化胞嘧啶的高灵敏度绘图

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甲基化胞嘧啶的高灵敏度绘图

S J克拉克等。 核酸研究. .
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摘要

DNA甲基化及其在发育、衰老和癌症期间的基因控制中的潜在作用,由于缺乏敏感的方法,仅能从少量DNA中解析精确的甲基化模式,因此阻碍了人们对DNA甲基化的理解。我们现在已经开发了一种基因组测序技术,它能够使用从少于100个细胞中分离的DNA检测任何靶序列的两条链上的每一甲基化胞嘧啶。在该方法中,在5-甲基胞嘧啶保持非反应性的条件下,亚硫酸氢钠用于将单链DNA中的胞嘧啶残基转化为尿嘧啶残基。转化的DNA用特定引物扩增并测序。序列中剩余的所有胞嘧啶残基代表基因组中先前甲基化的胞嘧啶。所述工作定义了最大限度提高变性、亚硫酸氢盐转化和扩增效率的程序,以允许从生殖细胞和早期发育阶段容易获得的少量基因组DNA中对单个基因进行甲基化绘图。

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引用人

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