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.1993年3月;120(5):1251-61.
doi:10.1083/jcb.120.5.1251。

小鼠分化特异性角蛋白1和10需要预先存在的角蛋白支架来形成纤维网

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小鼠分化特异性角蛋白1和10需要预先存在的角蛋白支架来形成纤维网

T卡尔塔索娃等。 J细胞生物学. 1993年3月.

摘要

角质蛋白1(K1)和10(K10)是表皮细胞从增殖期过渡到终末分化期的主要细胞骨架中间丝。在原位,K1/K10中间丝网络的形成发生在细胞的细胞质中,细胞骨架由角蛋白5和14组成。为了确定K1/K10丝状网络形成所需的细胞骨架相互作用,将小鼠K1和K10基因的活性拷贝引入正常不表达这些蛋白的成纤维细胞(NIH 3T3)。使用特异性抗体评估瞬时和稳定的转染子以及通过与上皮细胞融合产生的异核体的K1和K10蛋白的表达和丝的形成。与角蛋白对K5/K14和K8/K18相比,K1/K10对自身未能形成广泛的角蛋白纤维网,尽管EM在细胞质中观察到小的孤立密集的K1/K1O纤维束。NIH 3T3融合后,K1和K10纤维仅整合到先前存在的K5/K1网络中上皮细胞表达内源性K5/K14的细胞或NIH 3T3细胞转染K5和K14基因活性拷贝的细胞。在NIH 3T3瞬时转染中测试角蛋白1、5、10和14的活性重组基因构建组合时,免疫荧光观察到的最完整的细胞角蛋白网络由K5/K14对形成。K1/K14对能够形成细胞骨架网络,但网络发育不良,通常位于核周。K10与K5或K1联合转染可导致细胞质聚集,但不能形成细胞骨架。这些结果表明表皮基底上细胞骨架的形成依赖于先前存在的基底细胞中间丝网络。此外,K10对丝形成的限制似乎比K1更严格。

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