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.1981年3月;31(3):1161-76.
doi:10.1128/iai.31.3161-1176.1981。

沙眼衣原体主要外膜蛋白的纯化及部分性质

沙眼衣原体主要外膜蛋白的纯化及部分性质

H D考德威尔等。 感染免疫. 1981年3月.

摘要

对C、E和L2型沙眼衣原体的基本体(EB)进行外源放射性碘标记,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这些血清型的全细胞裂解物进行比较。多肽谱的放射自显影术鉴定出一种主要的表面蛋白,其表观亚单位分子量为39500,这是每种沙眼衣原体血清型所共有的。非离子(Triton X-100)、偶极离子(Zwittergent TM-314)、温和(脱氧胆酸钠和N-月桂酰肌氨酸钠)和强阴离子(SDS)的能力通过对每次洗涤剂处理后获得的可溶性和不溶性组分的SDS-PAGE分析,研究了从L2血清型的完整EB中提取该蛋白的洗涤剂。只有SDS很容易从完整的EB中提取这种蛋白质。Sarkosyl处理选择性地溶解了大多数其他EB蛋白,使39500-dalton蛋白与Sarkosil不可溶部分相关。Sarkosyl不溶性EB颗粒的超微结构研究表明,它由空EB颗粒组成,具有明显完整的外膜。没有发现肽聚糖样细胞壁的结构证据。从形态学上看,这些衣原体外膜复合体(COMC)类似于完整的衣原体EB外膜。用2%十二烷基硫酸钠在60℃下处理COMC,从COMC中定量提取39500-dalton外膜蛋白。该蛋白占COMC相关蛋白总量的61%,其提取导致COMC膜结构和形态的伴随损失。从SDS处理的COMC中获得的可溶性提取物被吸附到羟基磷灰石柱上,并用线性磷酸钠梯度洗脱。39500-dalton蛋白以约0.3M的磷酸盐浓度作为单峰从色谱柱中洗脱。洗脱的蛋白通过SDS-PAGE几乎是均匀的,并且没有污染碳水化合物、糖脂和核酸。针对来自L2血清型的39500-dalton蛋白制备的超免疫小鼠抗血清与沙眼衣原体Ba、E、D、K、L1、L2和L3血清型通过EB间接免疫荧光反应,但与A、B、C、F、G、H、I和J血清型、沙眼衣藻小鼠肺炎株或鹦鹉热衣原体猫肺炎没有反应,豚鼠包涵体结膜炎或6BC菌株。因此,39500-dalton主要外膜蛋白是沙眼衣原体的血清组抗原。

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    1. 美国国家科学院院刊1963年9月;50:499-506-公共医学
    1. 细菌杂志。1963年3月;85:707-11-公共医学
    1. 细菌杂志。1967年10月;94(4):1178-83-公共医学
    1. 自然。1970年8月15日;227(5259):680-5-公共医学
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