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.1985年12月15日;260(29):16004-11.

从小鼠L细胞条件培养基中纯化两种形式的集落刺激因子

  • PMID: 3877728
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从小鼠L细胞条件培养基中纯化两种形式的集落刺激因子

A W伯吉斯等。 生物化学杂志. .
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摘要

采用改良的小鼠L细胞条件培养基中的集落刺激因子(CSF)纯化程序,分离出两种形式的CSF,通过反相高效液相色谱和300-A孔径载体分离。这些脑脊液的比生物活性(2×10(9)个菌落/mg)大大高于其他方法。即使在高浓度(200 pM)下,这两种分子刺激的巨噬细胞也明显多于粒细胞集落;然而,疏水性较低的形式似乎刺激了更纯粒细胞集落的形成。从L细胞调节培养基中回收的疏水性较低的脑脊液几乎是前者的两倍。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,两种形式的L细胞CSF的表观分子量约为70000道尔顿。然而,在用2-巯基乙醇还原时,虽然两种形式都生成39000道尔顿亚基,但疏水性较低的形式也生成32000道尔顿亚单位。在pH 2.1的条件下,在乙腈或异丙醇的存在下储存任何形式的L细胞CSF,都会破坏其生物活性。在这些条件下储存的L细胞脑脊液的电泳分析表明,这与脑脊液二聚体自发分解为非活性亚单位有关。存在一些电荷异质性(pI 3.5-4.7),表明糖基化程度不同。两种CSF的独特N端氨基酸序列相同:(Lys-Glu-Val-Ser-Glu-His-X-Ser-His-Met-Ile-Gly-Asn)。因此,两种L细胞CSF亚单位的多肽链似乎是相同的。

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