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.2023年5月15日；14(1):131.
doi:10.1186/s13287-023-03369-6。

间充质干细胞移植联合IronQ通过Mincle/syk信号通路减轻ICH诱导的炎症反应

杨国强 1 2 三 4, 吉拉波恩·坎塔潘 1 2, 玛丽亚姆·马扎尔 5 6, 薛白 6 7, 邹远霞 1 2 三, 王红莲 三, 黄炳峰 8, 杨思静 5 6, Nathupakorn Dechsupa公司 9 10, 李旺 11 12
附属公司

间充质干细胞移植联合IronQ通过Mincle/syk信号通路减轻ICH诱导的炎症反应

杨国强等。 干细胞研究与治疗. .

摘要

背景：脑出血（ICH）是一种严重的脑损伤疾病，伴有脑水肿、炎症和随后的神经功能缺损。间充质干细胞（MSCs）移植因其抗炎作用而被用作神经系统疾病的神经保护治疗。然而，ICH后严重的炎症反应限制了移植MSC的生物学特性，包括生存率、生存能力和有效性。因此，提高间充质干细胞的存活率和生存能力将为ICH提供一种有希望的治疗效果。值得注意的是，配位化学介导的金属-槲皮素复合物的生物医学应用已经得到了积极的验证和广泛的研究，包括生长促进和成像探针。先前的研究表明，铁-槲皮素复合物（IronQ）具有非凡的双重功能，具有细胞生长刺激剂和磁共振成像（MRI）成像探针。因此，我们假设IronQ可以提高MSCs的存活率和生存率，在ICH治疗中显示抗炎功能，同时标记MSCs进行MRI追踪。本研究旨在探讨IronQ对MSCs炎症调节的作用，并进一步阐明其潜在机制。

方法：本研究采用C57BL/6雄性小鼠。建立胶原酶Ⅰ诱导的ICH小鼠模型，24h后随机分为模型组（model）、槲皮素灌胃组（quercetin）、MSCs移植组（MSCs）和MSCs移植联合IronQ组（MSCs+IronQ），如TNF-α、IL-6、NeuN、MBP以及GFAP。我们进一步测量了Mincle及其下游靶点的蛋白表达。此外，利用脂多糖（LPS）诱导的BV2细胞研究MSCs与IronQ体外共培养条件培养液的神经保护作用。

结果：我们发现，MSCs与IronQ联合治疗通过抑制Mincle/syk信号通路改善了炎症诱导的神经功能缺损和体内BWC。来源于与IronQ共培养的MSCs的条件培养基降低了LPS诱导的BV2细胞系中的炎症、Mincle及其下游靶标。

结论：这些数据表明，联合治疗通过下调ICH后Mincle/syk信号通路，在减轻ICH诱导的炎症反应方面发挥协同作用，从而进一步改善神经功能缺损和脑水肿。

关键词：炎症反应；脑出血；IronQ；间充质干细胞；明克尔。

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利益冲突声明

提交人声明，他们没有相互竞争的商业和金融利益。

数字

图1
图1
实验协议的概念图。A类实验小鼠分组、治疗策略和实验程序的简要时间表。B类移植MSCs和MSCs+IronQ的ICH小鼠模型示意图
图2
图2
MSCs和IronQ标记MSCs在倒置相差显微镜和3.0T MRI上的图像。A类流式细胞术鉴定MSCs的结果。B类第3-6代MSC呈簇状生长。比例尺=100μm。C、 D类未经培养的MSC图像(B类)和(C类)24 h后用普鲁士蓝染色法检测IronQ。比例尺=100μm。E类MSCs铁Q的MTT分析。F类假手术组、模型组和MSCs+IronQ组小鼠脑冠状面、轴面和矢状面T1W图像。Arrow表示ICH小鼠脑组织中同侧纹状体出血（暗）区有出血（暗区）和IronQ标记的MSCs（白点）。比例尺=1 cm
图3
图3
MSCs+IronQ移植可减轻ICH小鼠的神经功能缺损，保护脑实质和神经元。A类mNSS的结果显示了各组小鼠在第1天和第3天的得分(n个 = 每组5个*P（P） < 0.05, ***P（P） < 0.001，以及****P（P） < 0.0001).B类每组脑样本的BWC(n个===============================================================================每组5个*P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，以及****P（P） < 0.0001).C类各组小鼠脑组织同侧纹状体进行脑组织HE染色。比例尺=100μm。D类在每组小鼠脑组织的同侧纹状体中进行脑样本的尼斯氏染色。比例尺=100μm
图4
图4
MSCs和IronQ联合治疗增加ICH小鼠的NeuN、MBP和GFAP蛋白表达(A-C公司)免疫荧光结果显示ICH后小鼠脑组织同侧纹状体中NeuN、MBP和GFAP的蛋白表达水平(n个 = 每组5个）。比例尺=100μm。D-G公司NeuN、MBP和GFAP蛋白表达的western blot结果和分析(n个 = 每组5个**P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001)
图5
图5
MSCs和IronQ联合治疗可降低ICH小鼠的炎症反应。A、 B类双免疫荧光结果显示F4/80与IL-6和TNF-α在各组小鼠脑组织切片同侧纹状体共表达。合并图形中显示共同定位信号的颜色变化分别对应于红色+绿色=黄色；红色+蓝色=洋红色。比例尺=100μm（顶部面板）。白色方框区域在底部面板中以较高的放大倍数显示。C-D公司显示了IL-6和TNF-α阳性细胞的统计图(n个 = 每组5个***P（P） < 0.001，以及****P（P） < 0.0001).E–G公司各组IL-6和TNF-α蛋白表达的western blot结果及分析(n个============================================================================每组5个*P（P） < 0.05，以及****P（P） < 0.0001)
图6
图6
MSCs和IronQ联合治疗调节Mincle/syk信号通路以改善ICH结局。A类双重免疫荧光结果显示，各组小鼠脑组织同侧纹状体中F4/80与Mincle共表达(n个========================================================每组5个）。合并图形中显示共同定位信号的颜色变化分别对应于红色+绿色=黄色；红色+蓝色=洋红色。刻度条=100μm（顶板）。白色方框区域在底部面板中以较高的放大倍数显示。B-E公司各组ICH小鼠Mincle、p-syk和p-NFκB-65蛋白表达的western blot结果和分析(n个 = 每组5个*P（P） < 0.05，以及****P（P） < 0.0001)
图7
图7
qPCR和western blot的结果和分析表明，含IronQ的MSCs条件培养液降低了Mincle和炎症细胞因子的mRNA和蛋白表达。A–D图形的表示A类明克尔，B类IL-6，C类肿瘤坏死因子-αD类6h后不同细胞组IL-1βmRNA的相对表达(n个 = 每组3个*P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，以及****P（P） < 0.0001).E–J公司结果显示，LPS诱导的BV2细胞系中IL-6、TNF-α、Mincle和p-syk的western blot结果和分析。E类代表性免疫印迹显示IL-6、TNF-α、Mincle、syk、p-syk、p-NFκB-65、NFκ的B-65和GAPDH蛋白表达；（F-J）定量密度比F类IL-6，G公司肿瘤坏死因子-α，H（H）Mincle，相对于GAPDH，我p-syk相对于syk和J型相对于NFκB-65的p-NFκ的B-65(n个 = 每组3个*P（P） < 0.05时**P（P） < 0.01，以及****P（P） < 0.0001)
图8
图8
qPCR和western blot的结果和分析表明，MSCs条件培养液中的IronQ通过调节Mincle/syk信号通路减少炎症反应。A-C公司图的表示A类明克尔，B类IL-6和C类6 h后不同细胞组TNF-αmRNA表达水平(n个 = 每组3个*P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，以及****P（P） < 0.0001).D-J公司western blot的结果和分析显示了各细胞组中IL-6、TNF-α、Mincle、p-syk和p-NFκB-65的蛋白表达水平。D、 G公司代表性免疫印迹显示条件培养基对IL-6、TNF-α、Mincle、syk、p-syk、NFκB-65、p-NFκ）B-65和GAPDH蛋白表达的影响(E–F、H–J); 定量密度比E类IL-6，F类肿瘤坏死因子-α，H（H）相对于GAPDH的铸币，我p-syk相对于syk，J型相对于NFκB-65的p-NFκ的B-65(n个 = 每组3个****P（P） < 0.0001). 与其他治疗组相比，含IronQ的MSCs条件培养基在24小时后显著降低Mincle及其下游p-syk和p-NFκB-65蛋白的表达
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    1. Schrag M，Kirshner H。脑出血的管理：JACC焦点研讨会。美国心脏病杂志。2020;75(15):1819–1831. doi:10.1016/j.jacc.2019.10.066。-内政部-公共医学
    1. Kirshner H，Schrag M.脑出血的管理：更新和未来治疗。《Curr Neurol Neurosci Rep.2021》；21（10）：57。doi:10.1007/s11910-021-01144-9。-内政部-公共医学
    1. Gross BA、Jankowitz BT、Friedlander RM。脑实质内出血：综述。JAMA公司。2019;321(13):1295–1303. doi:10.1001/jama.2019.2413。-内政部-公共医学
    1. Hanley DF、Thompson RE、Rosenblum M、Yenokyan G、Lane K、McBee N等。脑出血后送溶栓微创手术（MISTIE III）的疗效和安全性：一项随机、对照、开放标签、盲法终点3期试验。柳叶刀。2019;393(10175):1021–1032. doi:10.1016/S0140-6736（19）30195-3。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Feigin VL、Lawes CM、Bennett DA、Barker Collo SL、Parag V。56项基于人群的研究报告了全球中风发病率和早期病死率：一项系统综述。柳叶刀神经病学。2009;8(4):355–369. doi:10.1016/S1474-4422（09）70025-0。-内政部-公共医学

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