MIR205HG acts as a ceRNA to expedite cell proliferation and progression in lung squamous cell carcinoma via targeting miR-299-3p/MAP3K2 axis

doi:10.1186/s12890-020-1174-2

.2020年6月8日；20(1):163.

doi:10.1186/s12890-020-1174-2。

MIR205HG作为ceRNA通过靶向miR-299-3p/MAP3K2轴加速肺鳞癌细胞增殖和进展

刘利民¹, 李玉雷¹, 张瑞芳¹, 李春¹, 景雄¹, 袁伟²

附属公司

¹中国湖北省武汉市武昌区土家岭9号武汉科技大学附属天佑医院呼吸科，430064。
²中国湖北省武汉市东西湖区银滩路1号武汉金银滩医院门诊三病房，邮编：433013。touyuangeng695@163.com。

PMID： 32513149
预防性维修识别码： PMC7278044号
内政部： 10.1186/12890-020-1174-2

MIR205HG作为ceRNA通过靶向miR-299-3p/MAP3K2轴加速肺鳞癌细胞增殖和进展

刘利民等。 BMC肺内科. 2020.

.2020年6月8日；20(1):163.

doi:10.1186/s12890-020-1174-2。

作者

刘利民¹, 李玉雷¹, 张瑞芳¹, 李春¹, 景雄¹, 袁伟²

附属公司

¹武汉科技大学附属天佑医院呼吸科，中国湖北省武汉市武昌区涂家岭9号，430064。
²中国湖北省武汉市东西湖区银滩路1号武汉金银滩医院三病房门诊部，邮编：433013。touyuangeng695@163.com。

PMID： 32513149
预防性维修识别码： PMC7278044号
内政部： 10.1186/s12890-020-1174-2

摘要

简介：长非编码RNA（lncRNAs）与多种癌症相关，但其在肺鳞状细胞癌（LUSC）中的分子机制尚未完全研究。因此，本研究探讨了microRNA-205宿主基因（MIR205HG）在LUSC中的调控作用，并识别了该lncRNA管理的靶基因。

方法：通过定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）分析评估MIR205HG的表达。通过集落形成实验、跨阱实验、流式细胞仪分析和western blot分析检测沉默MIR205HG对细胞生物学行为的影响。采用荧光素酶报告法和RNA免疫沉淀法（RIP）证明miR-299-3p与MIR205HG/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶2（MAP 3 K2）之间的结合关系。

结果：MIR205HG在LUSC组织和细胞系中的表达水平明显上调。下调MIR205HG表达显著降低细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化（EMT）进程，同时促进细胞凋亡。MIR205HG可与miR-299-3p结合，下调MIR205 HG可提高miR-299-3p的表达。MAP 3 K2作为miR-299-3p的靶基因，并被MIR205HG过度表达上调。过度表达MAP 3 K2可以在一定程度上抵消下调MIR205HG对LUSC进展的影响。

结论：MIR205HG作为一种竞争性内源性RNA（ceRNA），通过靶向LUSC中的miR-299-3p来加速细胞增殖和进展。

关键词：竞争性内源性RNA（ceRNA）；肺鳞状细胞癌；MAP 3 K2；MIR205HG；miR-299-3页。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者确保在这项工作中没有相互竞争的利益。

数字

图1
降低MIR205HG表达会损害LUSC的细胞增殖和迁移能力。一GEPIA数据集用于检测MIR205HG在LUSC组织和邻近正常组织中的相对表达。b条进行qRT-PCR检测MIR205H在正常肺鳞状细胞系（BEAS-2B）和LUSC细胞系（NCI-H520、SK-MES-1和NCI-H1703）中的不同表达。**c（c）**通过qRT-PCR分析测定MIR205H下调条件下MIR205 H的相对表达。d日。通过菌落形成试验评估菌落数量，以检测细胞增殖能力。**e（电子）**流式细胞术分析细胞凋亡率。**（f）**Transwell测定法用于通过计数迁移的细胞的数量来测量细胞迁移能力。克western blot分析检测上皮标记物（E-cadherin）和间充质标记物（N-cadherin和Vimentin）的表达。所有数据均显示为平均值±SD**P（P）* < 0.05, ***P（P）* < 0.01

图2
MIR205HG是LUSC中miR-299-3p的上游因子。一LUSC中潜在的miRNA表达可从dbDEMC 2网站下载。b条RIP分析用于确认MIR205HG和miR-299-3p之间的关系。**c（c）**StarBase数据库用于预测MIR205HG和miR-299-3p之间的潜在结合位点。d日进行荧光素酶报告物分析以验证MIR205HG可以与miR-299-3p结合。**e（电子）**qRT-PCR分析用于评估miR-299-3p在两种转染sh-MIR205HG#1的细胞系中的相对表达。所有数据均显示为平均值±SD***P（P）* < 0.01

图3
MAP 3 K2是miR-299-3p的靶基因，由MIR205HG间接调控。一使用维恩数据展示来自3个数据库（RNA22、miRmap和miRanda）的共同靶mRNA。b条。miR-299-3p的潜在靶点可从starBase网站下载。**c（c）**StarBase数据库显示了MAP 3 K2和miR-299-3p之间的结合位点。d日通过荧光素酶报告物分析进一步评估MAP 3 K2和miR-299-3p之间的结合作用。**e（电子）**RIP分析证实MIR205HG、miR-299-3p和MAP 3 K2在RISC中共存。**（f）**Western blot分析检测转染sh-MIR205HG#1和pcDNA3.1/MAP 3 K2的细胞系MAP 3 K2蛋白表达水平。所有数据均以平均值±标准差表示***P（P）* < 0.01

图4
MIR205HG通过调节miR-299-3p/MAP 3 K2信号传导来加速LUSC的发展。一采用集落形成实验检测sh-MIR205HG#1和pcDNA3.1/MAP 3 K2转染后两种细胞的增殖能力。b条流式细胞术检测细胞凋亡率。**c（c）**.通过跨阱分析估算细胞迁移能力。d日通过western blot分析评估EMT相关蛋白水平。所有数据均表示为平均值±标准偏差***P（P）* < 0.01

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