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.2020年10月:53:101611。
doi:10.1016/j.mcp.2020.1011。 Epub 2020年5月30日。

多重qPCR检测评估大鼠组织/样品中参考基因表达稳定性

附属公司

多重qPCR检测评估大鼠组织/样品中参考基因表达稳定性

亚历山大·P·施瓦茨等。 分子细胞探针. 2020年10月.

摘要

RT-qPCR需要充分选择稳定表达的参考基因,以准确规范mRNA表达。然而,测试一组参考基因往往既耗时又昂贵。在这项工作中,我们旨在开发一套用于RT-qPCR分析实验室大鼠常用家政基因的多重实时PCR方法。利用水解探针(TaqMan®)技术,我们设计并优化了三种三重qPCR分析(Actb+Gapdh+B2m;Rpl13a+Sdha+Ppia;Hprt1+Pgk1+Ywhaz),证明了最佳PCR扩增效率(94.7%至100.5%)和重复性。新的分析方法允许在3个反应中分析9个参考基因的表达,与广泛的单复合体分析方法相比,在Wistar大鼠RT-qPCR实验中选择参考基因的时间效率更高。

关键词:基因表达分析;多重实时PCR检测;RT-qPCR;大鼠;参考基因稳定性。

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