Experimental Assays to Assess the Efficacy of Vinegar and Other Topical First-Aid Approaches on Cubozoan (Alatina alata) Tentacle Firing and Venom Toxicity

doi:10.3390/toxins8010019

.2016年1月11日；8(1):19.

doi:10.3390/toxins8010019。

食醋和其他外用急救方法对古巴（Alatina alata）触手射击和毒液毒性的疗效评估实验分析

天使A Yanagihara^1 2, 克里斯蒂·威尔科克斯^三, 丽贝卡·金⁴, Kikiana Hurwitz公司^5 6, 安·M·卡斯特尔弗朗科⁷

附属公司

¹美国夏威夷大学马诺分校约翰·A·伯恩斯医学院热带医学、医学微生物学和药理学系，夏威夷州火奴鲁鲁，邮编96822。ayanagih@hawaii.edu。
²美国夏威夷大学马诺阿分校海洋与地球科学技术学院太平洋生物科学研究中心Békésy神经生物学实验室，邮编96822。ayanagih@hawaii.edu。
^三美国夏威夷大学马诺分校约翰·A·伯恩斯医学院热带医学、医学微生物学和药理学系，夏威夷州火奴鲁鲁，邮编96822。wilcoxcl@hawaii.edu。
⁴美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。rak62123@hawaii.edu。
⁵美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。kikiana@go.byuh.edu。
⁶夏威夷杨百翰大学自然科学系，火奴鲁鲁，HI 96717，美国。kikiana@go.byuh.edu。
⁷美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。castlef@pbrc.hawaii.edu。

PMID： 26761033
预防性维修识别码：项目经理4728541
内政部： 10.3390/有毒8010019

食醋和其他外用急救方法对古巴（Alatina alata）触手射击和毒液毒性的疗效评估实验分析

天使A Yanagihara等。毒素（巴塞尔）. 2016.

.2016年1月11日；8(1):19.

doi:10.3390/toxins8010019。

作者

天使A Yanagihara^1 2, 克里斯蒂·威尔科克斯^三, 丽贝卡·金⁴, Kikiana Hurwitz公司^5 6, 安·M·卡斯特尔弗朗科⁷

附属公司

¹美国夏威夷大学马诺分校约翰·A·伯恩斯医学院热带医学、医学微生物学和药理学系，夏威夷州火奴鲁鲁，邮编96822。ayanagih@hawaii.edu。
²美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。ayanagih@hawaii.edu。
^三美国夏威夷大学马诺分校约翰·A·伯恩斯医学院热带医学、医学微生物学和药理学系，夏威夷州火奴鲁鲁，邮编96822。wilcoxcl@hawaii.edu。
⁴美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。rak62123@hawaii.edu。
⁵美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。kikiana@go.byuh.edu。
⁶夏威夷杨百翰大学自然科学系，火奴鲁鲁，HI 96717，美国。kikiana@go.byuh.edu。
⁷美国夏威夷大学马诺分校海洋和地球科学与技术学院太平洋生物科学研究中心贝凯西神经生物学实验室，火奴鲁鲁HI 96822。castlef@pbrc.hawaii.edu。

PMID： 26761033
预防性维修识别码：项目经理4728541
内政部： 10.3390/有毒8010019

摘要

尽管古巴毒液引发了医疗紧急情况，但无效且矛盾的急救管理建议仍然存在。进展的一个关键障碍是缺乏现成且可重复的毒液测定方法，即（1）重述活齿叮咬；（2）允许对cnidae放电进行定量和成像；（3）允许对毒液毒性进行初步定量；（4）采用严格的控制。我们报告了为满足上述标准而设计的三种实验方法的集成阵列的实施情况。这三种方法在机械上重叠，但又不同，包括（1）用单一图像和视频显微镜直接在活触手上应用测试溶液（称为触手溶液分析，或TSA）；（2）使用覆盖在琼脂糖悬浮的活人红细胞底物上的新鲜切下的触须进行自发叮咬试验（触须血琼脂糖试验，简称TBAA）；和（3）TBAA（触手皮肤血琼脂糖试验，或TSBAA）的“皮肤”覆盖适应。我们报告了这些测定的用途和结果，以评估局部急救方法抑制触手放电和毒液活性的疗效。TSA结果包括酒精对巨量毒蛇放电的强烈刺激，但只有尿液、淡水和“可乐”（碳酸软饮料）的适度诱导。虽然醋是40年来去除附着触手的急救现场标准，在TSA和TSBAA离体模型中完全抑制了蛇科动物的触手放电，但使用新开发的专利配方（Sting No More™）观察到对触手放电和随后毒液诱导的溶血的最显著抑制作用含有葡萄糖酸铜、硫酸镁和尿素。

关键词：Alatina alata；Sting No More™；葡萄糖酸铜；立方烷；急救；溶血；水母；刺入；毒液；醋。

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数字

图1
自发刺入的可视化离体模型。黑色箭头表示排出的蠓类，其小管明显穿透琼脂糖；白色箭头表示未出院的cnidae。(A类)现场*A.阿拉塔*触手具可见的蛇形纲带；(B类)放大倍率更高，以显示cnidae条带，并允许对触手cnidae进行量化；(C)Cnidae从活触手排出到血液琼脂糖中（TBAA）；(D类)去触手后蛇床子残留在血琼脂糖上（TBAA）；(E类)触须去除后蛇床子留在人工“皮肤”上（TSBAA）；(F类)用胶带法将蛇床子从叮咬后的人类皮肤上取下。

图2
半-毒液溶血单位与溶血区大小（mm）之间的对数相关性^三). 溶血区呈对数剂量依赖性。

图3
每种蛇科动物溶血单位和每毫米触手溶血单位的数学推导。井径为2mm(A类)溶血1 mm所需溶血单位的衍生^三从剂量-反应曲线的线性部分来看，37°C下1小时后，1.0%RBC溶于1.5%琼脂糖中；(B类)根据触手测量值、排出的蛇科动物计数以及以A计算的每体积溶血单位，推导出每毫米触手和每种蛇科动物释放的溶血单位。

图4
用TBAA进行事后处理后溶血区的大小。在对照和实验数据集中，溶液之间存在显著差异（单向方差分析；对两者均<0.0001；与未使用Holm’s治疗的患者相比有显著差异*事后（post-hoc）*用彩色星号表示的多重比较试验，*）。醋、水母、鱿鱼的对照中有显著的溶解作用^®和StingMate^®(对<0.05，来自Holm-Sidak事后（post-hoc）多重比较试验）揭示了血液琼脂糖模型（溶液诱导裂解）的局限性，促使皮肤替代物的开发。黑色星号表示单独接触触手引起的溶血与使用所列试验溶液治疗后触手引起溶血之间存在显著差异。

图5
TSA中试验溶液的影响。在不同的测试溶液中10分钟后，蛇床子从触须中放电。(A类)海水；(B类)醋；(C)利多卡因；(D类)尿液；(E类)可乐碳酸饮料；(F类)饱和Epsom盐；(**G公司**)异丙醇；(**H（H）**)乙醇；(我)淡水；(J型)Sting No More™喷雾；(**K（K）**)水母鱿鱼^®；(我)StingMate公司^®.海水、醋、利多卡因和Epsom盐(A类–C,F类)没有诱发小腿线虫排泄。尿液(D类)和淡水(我)随着时间的推移，诱发了少量放电。苏打水(E类)导致触手立即退化，cnidae放电在触手表面形成垫子。异丙醇和乙醇(**G公司**,**H（H）**)导致立即大量排放毒蛇。没有任何商业产品(J型–我)诱导的毒蛇放电。比例尺如图所示。

图6
TSBAA中的冲洗液效果（触手上）。去除触手溶液测试后的溶血区大小：在总叮咬时间5分钟内加入3分钟的溶液；灰色虚线表示未经治疗的平均溶血面积。防止巨蟹座流放的解决方案的平均面积百分比较小。冲洗液之间存在显著差异（单向方差分析，对< 0.01; 星号表示与不使用Holm-Sidak治疗有显著差异*事后（post-hoc）*多重比较试验；*方法对≤0.05，**表示对< 0.01). 市售Sting No More™喷雾和其中一种活性成分葡萄糖酸铜显著降低了溶血（以绿色突出显示），而淡水显著加剧了溶血性（以红色突出显示）。

图7
TSBAA现成急救方案的治疗效果（触手移除后）；灰色虚线表示未经治疗的平均溶血面积。解决方案之间存在显著差异（单向方差分析，对< 0.01; 星号表示与未使用Holm-Sidak事后多重比较测试的治疗有显著差异；*方法对=<0.05，**表示对<0.01），Epsom盐显著加剧溶血（以红色突出显示）。试验后温度处理之间也存在显著差异（单向方差分析，对= 0.03). 热水敷贴5分钟可显著减少溶血区（以绿色突出显示），而冰水敷贴则没有。

图8
商业化预防措施和叮后急救对TSBAA溶血区的影响；灰色虚线表示未经治疗的平均溶血面积。在预防措施之间发现显著差异（单因素方差分析，对< 0.01; * 表明不治疗对<0.05使用Holm-Sidak事后（post-hoc）多重比较试验）。只有Sting No More™霜显著减少了溶血面积（以绿色突出显示）。商业产品应用针刺治疗之间也存在显著差异（单向方差分析，对< 0.01). Sting No More™Spray显著减少了溶血（以绿色突出显示），而StingMate^®溶血明显加剧（以红色突出显示）。

图9
血液琼脂糖处理后的显微图像(A类)Sting No More™和(B类)海水。箭头指向放电的蛇科动物；cnidae胶囊约为10×20微米。在(A类)，数条排出的毒蛇栖息在红细胞中，表明该产品并没有阻止排出，但确实保护了排出毒液的溶血作用，而在(B类)，蛇科周围没有红细胞，表明毒液挤压后溶解了附近的所有细胞。

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1. Brotz L.、Cheung W.W.、Kleisner K.、Pakhomov E.、Pauly D.水母数量增加：大型海洋生态系统的趋势。水生生物。2012;690:3–20. doi:10.1007/s10750-012-1039-7。-内政部
1. 蛇床子环境治理。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://emedicine.medscape.com/article/769538-治疗.
1. 水母刺治疗。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://www.emedicinehealth.com/jellyfish_stings/page4_em.htm#jellyfsh_s。。。.
1. 水母刺。[（2015年8月25日查阅）]。在线可用：http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/jellyfish-stings/basics/tr。。。.
1. 澳大利亚复苏委员会指南9.4.5环境危害：水母蜇伤2010年7月。[（2015年6月13日访问）]。在线可用：http://resus.org.au/？wpfb_dl=41.

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[1] Brotz L.、Cheung W.W.、Kleisner K.、Pakhomov E.、Pauly D.水母数量增加：大型海洋生态系统的趋势。水生生物。2012;690:3–20. doi:10.1007/s10750-012-1039-7。-内政部

[2] Brotz L.、Cheung W.W.、Kleisner K.、Pakhomov E.、Pauly D.水母数量增加：大型海洋生态系统的趋势。水生生物。2012;690:3–20. doi:10.1007/s10750-012-1039-7。-内政部

[3] 蛇床子环境治理。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://emedicine.medscape.com/article/769538-治疗.

[4] 蛇床子环境治理。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://emedicine.medscape.com/article/769538-治疗.

[5] 水母刺治疗。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://www.emedicinehealth.com/jellyfish_stings/page4_em.htm#jellyfsh_s。。。.

[6] 水母刺治疗。[（2015年8月25日访问）]。在线可用：http://www.emedicinehealth.com/jellyfish_stings/page4_em.htm#jellyfsh_s。。。.

[7] 水母刺。[（2015年8月25日查阅）]。在线可用：http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/jellyfish-stings/basics/tr。。。.

[8] 水母刺。[（2015年8月25日查阅）]。在线可用：http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/jellyfish-stings/basics/tr。。。.

[9] 澳大利亚复苏委员会指南9.4.5环境危害：水母蜇伤2010年7月。[（2015年6月13日访问）]。在线可用：http://resus.org.au/？wpfb_dl=41.

[10] 澳大利亚复苏委员会指南9.4.5环境危害：水母蜇伤2010年7月。[（2015年6月13日访问）]。在线可用：http://resus.org.au/？wpfb_dl=41.

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