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.2014年10月；25(10):2201-12.
doi:10.1681/ASN.2013070735。 Epub 2014年4月3日。

下调刺猬信号降低小鼠模型的肾膀胱生成潜能

帕梅拉五世 1, 乔治·塔尔博特 2, Annick Turbe-Doan公司 2, 达蒙·雅各布斯 三, 迈克尔·肖恩菲尔德 三, 卢西安·席尔瓦 三, 安妮迪塔·查特吉 三, 玛丽·普雷萨克 2, 贝利·阿拉德 三, 大卫·R·拜尔 4
附属公司

下调刺猬信号降低小鼠模型的肾膀胱生成潜能

帕梅拉五世等。 J Am Soc肾病. 2014年10月.

摘要

肾囊性疾病是肾衰竭的主要原因。与肾囊性疾病相关的突变存在于编码定位于初级纤毛的蛋白质的基因中。这些膀胱蛋白可以破坏纤毛结构或纤毛介导的信号传导，尽管纤毛功能与肾脏膀胱形成之间的分子机制尚不清楚。睫状体基因Thm1（Ttc21b）负调节刺猬信号传导，在纤毛病中最常见突变。我们报告，小鼠Thm1缺失会导致囊性肾病，肾细胞持续增殖，cAMP水平升高，刺猬信号基因表达增强。值得注意的是，通过基因删除Hedgehog途径的主要转录激活物Gli2，或通过使用小分子Hedgehong抑制剂培养，Thm1全肾移植体的cAMP介导的膀胱生成潜能降低。这些Hedgehog抑制剂的作用独立于蛋白激酶A和Wnt抑制剂。此外，同时缺失Gli2可减轻与Thm1缺失相关的肾囊性疾病。最后，Hedgehog靶基因的转录物在另外两个同源小鼠突变体jck和Pkd1的囊性肾脏中增加，Hedgehog抑制剂减少了jck和Pkd1培养肾脏的囊性生成。因此，增强的刺猬活性可能在肾囊肿形成中发挥一般作用，从而提供新的治疗靶点。

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数字

图1。
图1。
THM1缺失会导致肾囊肿。（A） E16.5和P0 wt和Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏。与第二排面板相比，第一排面板上的黑色虚线方框显示的放大倍数更高。箭头指向扩张的肾小管Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏。（B） wt和Thm1型氮化铝/氮化铝肾单位节段。肾切片的荧光结合LTL（绿色）和Na联合免疫染色+K（K）+腺苷三磷酸酶（红色）。（C） 6周龄wt和厚度1cko肾脏。（D） %KW/BW，（E）BUN水平，以及（F）6周龄体重的cAMP水平Thm1型cko肾脏。条形代表4 wt小鼠和3 wt小鼠的平均值±SEMThm1型cko老鼠*P（P）<0.05.
图2。
图2。
年扩散加剧Thm1型cko囊性肾。（A） 6周龄wt和Thm1型cko肾脏单独用于PCNA或与（B）LTL、（C）THP或（D）DBA联合使用。（E） 6周龄体重和体重的增殖率Thm1型cko肾脏。PCNA数量+细胞根据特定小管的DAPI细胞数量进行划分。（F） P15 wt和Thm1型cko肾脏单独用于PCNA或与（G）LTL、（H）THP或（I）DBA联合使用。（J） P15 wt和Thm1型cko肾脏。所有比例尺代表500μ米。n个=3重量；n个=3Thm1型每个时间点的cko。
图3。
图3。
Thm1型cko肾初级纤毛显示IFT复合物A突变表型。（A） wt和Thm1型用于乙酰化的cko肾初级纤毛α-微管蛋白（红色）和IFT88（绿色）。比例尺代表25μm.（B）wt和Thm1型cko收集管（原始放大倍数，×2000）。比例尺代表15μm.（C）wt和Thm1型cko收集管初级纤毛（原始放大倍数，×15000）。比例尺代表3μm.（D）wt和Thm1型cko收集管初级纤毛。条形图表示的平均值±SEMn个=来自三只体重小鼠的23根纤毛n个=25根纤毛Thm1型cko老鼠*P（P）<5×10−8.
图4。
图4。
Hh信号传导的遗传或药物抑制可减少膀胱生成Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏移植和Thm1型cko肾脏。（A） E13.5重量，厚度1氮化铝/氮化铝、和Thm1型氮化铝/氮化铝，Gli2−/−肾脏与100个μM 8-溴环腺苷酸4天。肾脏图像的定量评估显示，在Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏比wt和膀胱生成潜能下降2倍Thm1型氮化铝/氮化铝，胶质2−/−肾脏相对于Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏。棒材代表4 wt，6的平均值±SEMThm1型氮化铝/氮化铝、和8Thm1型氮化铝/氮化铝，Gli2−/−来自两个实验的肾脏。（B） E13.5重量和Thm1型氮化铝/氮化铝肾脏在100人在场的情况下培养μM 8-溴环腺苷酸与10μM甘特图61，5μM Sant2，或控制DMSO 4天。图表表示培养4天后肾脏图像的定量评估。Gant61或Sant2降低正常和氮化铝肾脏。条形图表示11个对照组和7个对照组的平均值±SEM厚度1氮化铝/氮化铝Gant61的3个实验、9个对照和3个实验的肾脏Thm1型氮化铝/氮化铝Sant2的3个实验的肾脏。（C） 6周龄胎儿肾脏切片的苏木精和伊红染色，Thm1型cko和厚度1;Gli2公司双cko小鼠。（D） 24 wt的KW/BW倍差，11Thm1型cko和7Thm1；Gli2公司双cko小鼠。（E） BUN为8 wt，6Thm1型cko和3Thm1；Gli2公司双cko小鼠*P（P）<0.05; **P（P）<0.005; ***P（P）<0.0005.
图5。
图5。
小分子Hh抑制剂独立于PKA和Wnt抑制剂发挥作用，以降低肾移植体的膀胱生成潜能。（A） E13.5 CD1肾脏在100μM 8-溴-cAMP与DMSO结合，10μM甘特图61，5μM Sant2或10μM PKA抑制剂H89治疗4天。未经治疗的对侧肾脏作为对照。（B） 4天培养后肾脏图像的定量评估。条形代表平均值±SEM；n个=每个小分子6个肾脏。（C） P-CREB、CREB，GLI1、GLI2和GLI3的蛋白质印迹。将培养的肾脏汇集并均质，以形成蛋白裂解物。H89治疗的肾脏显示P-CREB显著降低。相比之下，甘特61和桑特2治疗的肾脏没有显示出这种下降。Sant2治疗的肾脏显示GLI1减少，GLI2轻微减少，GLI3R增加。Gant61治疗的肾脏没有GLI蛋白水平的改变。H89治疗的肾脏显示GLI1和GLI3A轻度降低。（D） 从E14.5 wt和Thm1型氮化铝/氮化铝将携带BAT-gal等位基因的小鼠用L-（对照）或Wnt3a调节培养基处理过夜，并分析其β-半乳糖苷酶活性。条形图表示3个实验的平均值±SEM。铝镍合金MEF对Wnt3a配体的反应增强。（E） 培养物的处理Thm1型氮化铝/氮化铝40个肾脏μM IWR-1不降低膀胱生成潜能。（F） 4天培养后肾脏图像的量化。条形代表平均值±SEM；n个=8控制和n个=3Thm1型氮化铝/氮化铝来自2个实验*P（P）<0.05; **P（P）<0.005; ***P（P）<0.0005.
图6。
图6。
Hh信号基因的表达在Thm1型奇科，杰克、和第1页cko囊性肾。（A） 使用5 wt和5 wt的RNA裂解物进行定量RT-PCR分析Thm1型cko肾脏，（B）5 wt和5 wt杰克肾脏，或（C）5 wt和4第1页cko肾脏。条形图表示的平均值±SEMPtch公司和格利折叠表达，归一化为看家基因绿洲1被认为是定量PCR中较为稳定、可靠的控制基因之一*P（P）<0.05; ***P（P）<0.0005; ****P（P）<0.00005.
图7。
图7。
小分子Hh抑制剂降低培养细胞的膀胱生成潜能杰克/杰克和第1页1贝/1贝肾脏。（A） 图13.5杰克/杰克肾脏和（B）E14.5第1页m1Bei（米1贝）/第1页m1Bei（米1贝）在100人在场的情况下培养μM 8-溴环腺苷酸与10μM甘特图61，5μM或10μM Sant2（用于杰克/杰克或第1页m1Bei（米1贝）/第1页m1Bei（米1贝）或控制DMSO 4天。图表示培养4天后肾脏图像的量化。条形代表平均值±SEM；n个=3重量，n个=9杰克/+、和n个=5杰克/杰克甘特61的3个实验的肾脏；n个=5重量，n个=9jck公司/+、和n个=8杰克/杰克Sant2的4个实验肾脏；n个=6重量，n个=12第1页m1Bei（米1贝）/+、和n个=9第1页m1Bei（米1贝）/第1页m1Bei（米1贝）来自Gant61的4个实验；n个=7重量，n个=10第1页m1Bei（米1贝）/+和n个=6第1页m1Bei（米1贝）/第1页m1Bei（米1贝）来自Sant2的4个实验*P（P）<0.05; **P（P）<0.005; ***P（P）<0.0005; ****P（P）<0.00005.
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    1. Quinlan RJ、Tobin JL、Beales PL:纤毛病建模：发育和疾病中的原发纤毛。当前顶尖开发人员生物84:249–3102008-公共医学
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